2007 Fiscal Year Annual Research Report
クラスターDNA損傷に対する修復欠損突然変異株の単離
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19510062
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| Research Institution | Japan Atomic Energy Agency |
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Principal Investigator |
鹿園 直哉 Japan Atomic Energy Agency, 先端基礎研究センター, 研究主幹 (10354961)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
横谷 明徳 日本原子力研究開発機構, 先端基礎研究センター, 研究主幹 (10354987)
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| Keywords | クラスターDNA損傷 / 突然変異 / 突然変異株 / 大腸菌 / 電離放射線 / DNA修復 |
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| Research Abstract |
非2本鎖切型のクラスターDNA損傷の変異抑制に関与する因子の同定を目指すため、大腸菌ストックセンター等から大腸菌株を入手し、P1形質導入法により各種のDNA修復欠損変異株を作成した。具体的には、fpg、nth,nei muttといった塩基除去修復系、mutS(ミスマッチ修復系)、recA(組換え修復/SOS修復)といった修復欠損株を作成した。今後、これらを用いDNA修復系が欠損した場合、クラスターDNA損傷による変異誘発頻度が変化するかどうかを調べる実験に着手する。
一方、モデルクラスターDNA損傷を構成する損傷として8-oxoG、Dihydrothymine,Thymine glycol,脱塩基部位、1本鎖切断等を相補鎖上に配置し、大腸菌内での8-oxoGの変異頻度を調べたところ、他の損傷が相補鎖上にあるときは全ての損傷で同程度の変異誘発頻度の増加がみられることを明らかにした。一方、損傷を8-oxoGと同一鎖に配置させると変異頻度の上昇が抑制される現象を見い出した。これは損傷の相対的な配置により生物効果が大きく異なることを示す非常に重要な結果である。
また、電離放射線によって生じるクラスターDNA損傷の生物効果を調べるため、大腸菌をメンブラン上に載せ、かつ、定温で照射できる試料ホルダーを製作し、照射方法を確立した。この方法は、飛程の短いイオン照射にも対応可能であり、今後の研究に重要である。
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Research Products
(13 results)
