2008 Fiscal Year Final Research Report

Cryotrapped reaction intermediates in cytochrome P450 and kineticsanalyses by newly developed rapid-freeze-quench EPR spectroscopy

Research Project

Project/Area Number	19550165
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Single-year Grants
Section	一般
Research Field	Chemistry related to living body
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	HORI Hiroshi Osaka University, 大学院・基礎工学研究科, 准教授 (20127294)
Project Period (FY)	2007 – 2008
Keywords	生物無機化学 / シトクロムP450cam / 一原子酸素添加反応 / 反応中間体 / 急速混合凍結装置 / 電子スピン共鳴 / EPR
Research Abstract	サブミリ秒領域で酵素反応の進行を停止させ、捕捉した反応中間体を電子スピン共鳴法で検出・同定するため、再現性の良い急速混合凍結システムを開発した(不感時間 0.2 ms)。酸化型シトクロムP450camと過酢酸の反応でポルフィリンπカチオンラジカル中間体分子種の捕捉・同定に成功した。還元型P450cam・電子供与体複合体と酸素分子との急速混合凍結実験で還元型ヘム鉄に結合している酸素分子が1電子還元されたペルオキシド型反応中間体分子種の捕捉に初めて成功した

(2 results)