2009 Fiscal Year Annual Research Report
癌腫病菌カバノアナタケに感染したシラカンバ植物体における全身獲得抵抗性機構の解明
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19580162
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| Research Institution | Utsunomiya University |
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Principal Investigator |
横田 信三 Utsunomiya University, 農学部, 准教授 (60210613)
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| Keywords | カバノアナタケ / シラカンバ / プロテオーム / 樹病 / サリチル酸 / 全身獲得抵抗性 / non-expresser of pathogenesis related 1 / oxygen evolving enhancer protein 2 |
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| Research Abstract |
本研究では、全身獲得抵抗性(SAR)を誘導することが知られているサリチル酸を、シラカンバNo.8幼植物体に人為的に投与し、植物体内でSARが生じるかどうかプロテオーム解析手法により解明することを試みた。組織培養によって育成した3ヶ月生無菌幼植物体に、0.5mMサリチル酸水溶液を1μL投与した(T)。対照区(無傷・無投与のもの(C1),超純水1μL投与したもの(C2))も同様に用意した。処理後2日目に各植物体を採集し、急速凍結・粉砕後、タンパク質溶液を調製した。これを等電点電気泳動にかけ、ゲルをクーマシーブリリアントブルー染色した。ゲルの画像解析を行い、各処理区に特異的なタンパク質スポットを検出した。その結果、C1では17個、C2では9個、Tでは20個、それぞれ特異的なスポットが検出された。Tに特異的なスポットを別のゲルから切り出し、ゲル内消化後、マトリックス支援レーザーイオン化・飛行時間型質量分析計で分析した。その結果、8種類のタンパク質(non-expresser of pathogenesis related 1(NPR1)-like protein ; predicted protein ; hypothetical protein ; oxygen evolving enhancer protein 2(OEE2) ; hypothetical or unknown protein ; Cerotodon purpureus phytochrome photoreceptor CERPU ; PHYO ; 2(CpPHY2) ; unknown protein ; MADS-domain transcription factor(MADSdtf)が同定された。(NPR1)-like proteinは、NPR1と同様に核内に移行して転写因子TGAに作用し、PR遺伝子発現を誘導すると考えられる。OEE2は、抗菌性二次代謝産物の生合成及びSARを誘導すると思われる。CpPHY2も、SARを誘導する可能性が考えられる。MADSdtfは、何らかのタンパク質発現を調節し、抵抗性を誘導していると予想される。これらの結果から、サリチル酸投与により、シラカンバNo.8幼植物体内にSARが誘導されることが明らかになった。
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