2008 Fiscal Year Annual Research Report
KSHVがコードするリン酸化酵素の生理機能の解明と創薬への展開
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19590097
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| Research Institution | University of Yamanashi |
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Principal Investigator |
藤室 雅弘 University of Yamanashi, 大学院・医学工学総合研究部, 准教授 (20360927)
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| Keywords | 創薬 / ウイルス / がん / 感染症 |
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| Research Abstract |
カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス(KSHV)は、感染者の免疫不全によりカポジ肉腫等の様々な日和見腫瘍を起こす。しかし、有効な治療薬が開発されていないKSHV感染症は深刻な問題である。我々はKSHV感染がん化B細胞に対して、高いウイルス選択性と殺細胞活性を有するヌクレオシド誘導体類を開発している。これら核酸代謝拮抗薬のウイルス選択性はKSHVの発現するチミジンリン酸化酵素(ORF21)やリン酸基転移酵素(ORF36)によるモノリン酸化効率と推測されるが、その真偽や作用機序は不明である。また、KSHVのORF21とORF36の基質特異性や生理的基質が明らかになれば、それらの情報は抗KSHV薬設計や開発を行なうための有益な情報となる。そこで、我々はKSHVのORF21とORF36の機能解析を行なった。
我々の開発した核酸誘導体類は、ウイルス非感染細胞には影響を与えず、KSHV感染Bリンフォーマ細胞株に対してアポトーシスを誘導する。このKSHV感染特異的な殺細胞活性の作用機序解明のため、ウイルス非感染細胞にKSHV-TKを一過的に発現させた細胞を用いて、核酸誘導体類の殺細胞活性を測定した。その結果、化合物の有するKSHV感染選択的な殺細胞活性は、KSHVのORF21によるヌクレオシドに対するモノリン酸化作用に起因することが明らかになった。一方で、KSHVのORF36の機能解析により、ORF36はORF36がE2F依存的転写活性化に関与し、KSHV感染細胞の細胞周期のG1期からS期移行を促進していることを明らかにした。また、NF-kB、Wnt、E2F、AP-1、STAT等のルシフェラーゼ・レポーター遺伝子を用いたプロモーター解析によりORF36がE2F経路の転写活性化を亢進することを明らかにしている。
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