2008 Fiscal Year Annual Research Report
羊膜幹細胞の同定法の確立および分化過程における組織構築の形態的解析
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19590186
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| Research Institution | University of Toyama |
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Principal Investigator |
吉田 淑子 University of Toyama, 医学薬学研究部(医学), 准教授 (00171421)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
二階堂 敏雄 富山大学, 医学薬学研究部(医学), 教授 (50180568)
岡部 素典 富山大学, 医学薬学研究部(医学), 助教 (60283066)
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| Keywords | ヒト羊膜 / マウス羊膜 / 羊膜幹細胞 / 同定法 / 分化能 / 骨分化 / 神経分化 |
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| Research Abstract |
1)ヒト羊膜から分離した羊膜上皮細胞(hAEC:human amnion epithelial cell)および羊膜間葉系細胞(hAMC: human amnion mesenchymal cell)の細胞学的性質を明確にし、分化能の検討を行った。
hAMCには、継代が可能で、強い増殖能を示す細胞群が存在することが明確となった。この細胞群は継代を繰り返すに従い、90%以上の細胞がCD73 (+), CD105 (+), CD90 (+)で、脂肪細胞、骨細胞、軟骨細胞への分化が可能であった。これらのことより本細胞群は羊膜間葉系幹細胞であると考えられる。現在、この細胞の株化を検討している。
hAECおよびhAMCいずれもspheroid形成能が高い。形成されたspheroidは内因性のalkaline phosphataseの活性が高く、Oct3/4(+), Nanog (+)、KLF-4 (+), c-myc (+)など、iPS細胞作成に不可欠な転写因子をすでに発現していることが明らかで、再生医療の材料として十分に意義があることが示唆された。
2)羊膜細胞の多分化能を検討するため、マウス羊膜から幹細胞の純化を検討した。
マウス羊膜細胞をlow attachment dishに播種するとsphereの形成が観察された。sphereはSSEA-1 (+) c-kit (-) alkalin phosphatase (+)あるいはSSEA-1 (-) c-kit (+)の2つの染色パターンを示した。さらに培地として上皮系細胞特有の培地あるいは間葉系特異の培地を使用することにより、これらのsphereが神経、神経膠細胞あるいは骨細胞および脂肪細胞に分化することが、免疫染色およびRT-PCRによって明確となった。
本研究の目的である羊膜幹細胞を純化することが可能となった。
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[Journal Article] Mutation- aging-, and gene-dosage-dependent accumulation of FENIB-type meuroserpin (G392E) in ERs and lysosomes of neurons in transgenic mice.2008
Author(s)
Akira Takasawa, Ichiro Kato, Kumi Takasawa, Yoko Ishi, Toshiko Yoshida Mohammad H. Shehata, hiroshi Kawaguchi, Omar M. M., ohafez, Masakiyo Sasahara, Koichi Hiraga
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Journal Title
J Biol Chem 283(51)
Pages: 35606-13
Peer Reviewed
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[Journal Article] Strom SC. Isolation and Characterization of Cells from Human Term Placenta.2008
Author(s)
1) Parolini O., Alviano F., Bagnara GP., Bilic G., Buhring H-J., Evangelista M., Hennerbichler S., Liu B., Magatti M., Mao N., Miki T., Marongiu F., Nakajima H., Nikaido T., Portmann-Lanz C-B., Sankar V., Soncini M., Stadler G., Surbek D., Takahashi T., Redle H., Sakuragawa N., Wolbank S., Zeisberger S., Zisch A
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Journal Title
Outcome of the First International Workshop on Placenta Derived Stem Cells. Stem Cells. 26
Pages: 300-311
Peer Reviewed
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[Presentation] マウス羊膜幹細胞の分化能2009
Author(s)
吉田淑子, Teng Zan, 周 凱旋, 岡部素典, 小池千加, 米田徳子, 野上真紀子, 樋口 収, 二階堂敏雄
Organizer
再生医療学会
Place of Presentation
東京
Year and Date
20090305-20090306
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[Presentation] マウス羊膜幹細胞の分化能2009
Author(s)
吉田淑子, Teng Zan, 周 凱旋, 岡部素典, 小池千加, 米田徳子, 野上真紀子, 樋口 収, 二階堂敏雄
Organizer
第8回日本再生医療学会総会
Place of Presentation
東京
Year and Date
20090305-20090306
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