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2008 Fiscal Year Annual Research Report

DNA損傷応答に関わる蛋白REV7の細胞増殖・運動と個体発生における重要性の検討

Research Project

Project/Area Number 19590387
Research InstitutionNagoya University

Principal Investigator

村雲 芳樹  Nagoya University, 大学院・医学系研究科, 准教授 (40324438)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 時々輪 真由美  名古屋大学, 大学院・医学系研究科, COE特任講師 (50378006)
KeywordsREV7 / DNA修復 / 細胞周期調節 / ノックアウトマウス / 結合蛋白 / マススペクトロメトリー
Research Abstract

REV7ノックアウトマウス樹立のため、REV7遺伝子のスタートコドンを欠損させるようにターゲッティングベクターを新たに構築し、ES細胞にエレクトロポレーションを行った。G418にてセレクション後、耐性クローンを約260個クローニングして、サザンブロッティングにて相同組み換え体のスクリーニングを行ったところ、2個の相同組み換え体が同定された。この2個のREV7遺伝子相同組み換え体からC57BL/6系マウスを用いてキメラマウスを合計9匹作成した。そのキメラマウスをC57BL/6系マウスと交配させ、生まれてきた子供のgenotypeをPCRにより確認したところ、REV7のヘテロノックアウトマウスを得ることができた。ヘテロマウスは外見上wild typeマウスと大きな違いはなく、発育も順調であり、生殖能力もあることまで判明した。
もう一つの課題である新規REV7結合蛋白の同定においては、昨年度同定した蛋白とREV7との結合を、いろいろな条件下での免疫沈降により確認し、更に種々の欠損変異体との結合を確認することにより結合ドメインの決定を行った。また、さらなるREV7結合蛋白の同定のため、GST融合REV7蛋白のpull down、またはタグをつけたREV7蛋白の免疫沈降により共沈してきた蛋白を、網羅的にmass spectrometryにより同定を試みた。その結果、REV7結合蛋白の候補として、DNA修復、発癌、シグナル伝達などに関わる複数の蛋白が新たに同定された。

  • Research Products

    (15 results)

All 2008

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 6 results) Presentation (9 results)

  • [Journal Article] A novel GDNF-inducible gene, BMZF3, encodes a transcriptional repressor associated with KAP-1.2008

    • Author(s)
      Suzuki C
    • Journal Title

      Biochem Biophys Res Commun 366

      Pages: 226-232

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] An actin-binding protein Girdin regulates the motility of breast cancer cells.2008

    • Author(s)
      Jiang P
    • Journal Title

      Cancer Res 68

      Pages: 1310-1318

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] GDNF-mediated signaling via RET tyrosine 1062 is essential for maintenance of spermatogonial stem cells.2008

    • Author(s)
      Jijiwa M
    • Journal Title

      Genes Cells 13

      Pages: 365-374

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] CD109 expression in basal-like breast carcinoma.2008

    • Author(s)
      Hasegawa M
    • Journal Title

      Pathol Int 58

      Pages: 288-294

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Roles of induced expression of MAPK phosphatase-2 in tumor development in RET-MEN2A transgenic mice.2008

    • Author(s)
      Hasegawa T
    • Journal Title

      Oncogene 27

      Pages: 5684-5695

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Upregulation of CD 109 expression is associated with carcinogenesis of the squamous epithelium of the oral cavity.2008

    • Author(s)
      Hagiwara S
    • Journal Title

      Cancer Sci 99

      Pages: 1916-1923

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] ヒトREV7及びMAD2タンパク質の結合モチーフ配列の部分的オーバーラッピング2008

    • Author(s)
      花房朋, 村雲芳樹, 土生敏行, 原幸大, 橋本博, 大橋英治, 大森治夫
    • Organizer
      第31回日本分子生物学会
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      20081209-12
  • [Presentation] 皮膚腫瘍におけるCD109の発現2008

    • Author(s)
      長谷川正規
    • Organizer
      第67回日本癌学会総会
    • Place of Presentation
      名古屋
    • Year and Date
      20081028-20081030
  • [Presentation] 遺伝性の癌 その研究と臨床の最前線 RETチロシンキナーゼのシグナル伝達と発がん2008

    • Author(s)
      高橋雅英
    • Organizer
      第67回目本癌学会総会
    • Place of Presentation
      名古屋
    • Year and Date
      20081028-20081030
  • [Presentation] TBP-2の発現抑制に関わる転写複合体の解析2008

    • Author(s)
      加藤琢哉
    • Organizer
      第67回日本癌学会総会
    • Place of Presentation
      名古屋
    • Year and Date
      20081028-20081030
  • [Presentation] 口腔癌におけるCD109の発現(CD109 expression in oral cancer).2008

    • Author(s)
      萩原純孝
    • Organizer
      第67回日本癌学会総会
    • Place of Presentation
      名古屋
    • Year and Date
      20081028-20081030
  • [Presentation] 基底細胞型乳癌の新しいマーカーとしてのCD109.2008

    • Author(s)
      長谷川正規
    • Organizer
      第97回日本病理学会総会
    • Place of Presentation
      金沢
    • Year and Date
      20080515-20080517
  • [Presentation] 乳腺腺筋上皮腫(adenomyoepithelioma)の1例.2008

    • Author(s)
      時々輪真由美
    • Organizer
      第97回日本病理学会総会
    • Place of Presentation
      金沢
    • Year and Date
      20080515-20080517
  • [Presentation] Choroid plexus papillary carcinomaの一例.2008

    • Author(s)
      鈴木智景
    • Organizer
      第97回日本病理学会総会
    • Place of Presentation
      金沢
    • Year and Date
      20080515-20080517
  • [Presentation] High-level expression of CD109 is frequently detected in lung squamous cell carcinomas.2008

    • Author(s)
      Murakumo, Y
    • Organizer
      99th Annual Meeting, American association for Cancer Research
    • Place of Presentation
      San Diego, USA
    • Year and Date
      20080412-20080416

URL: 

Published: 2010-06-11   Modified: 2016-04-21  

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