オステオポンチン蛋白多型部位を標的とする膠原病治療モデルの確立

2008 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19590394
• Research Institution: Ehime University
• Principal Investigator: 宮崎 龍彦 Ehime University, 大学院・医学系研究科, 准教授 (80239384)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 能勢 眞人 愛媛大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (70030913) ; 長谷川 均 愛媛大学, 大学院・医学系研究科, 准教授 (40164826)
• Keywords: オステオポンチン / 立体構造 / 競合的阻害 / 膠原病治療モデル / 糖脂質

Research Abstract

我々はこれまでに、膠原病疾患モデルマウスの疾患感受性を規定する候補遺伝子として同定され、その中で構造遺伝子多型に基づく蛋白多型を持っ因子、オステオポンチン(Opn)に関し、コムギ胚芽を用いた無細泡蛋白合成ンステムにより多型蛋白を合成し、それぞれの蛋白の構造・機能こ差異があることを明らかにしてきた。最近申言諸らは疾患好発系と嫌発系のアレル間にみられる10カ所のアミノ酸多型のうち特定の一カ所が、少なくとも炎症誘導能に関する機能的差異を規定していることを突き止めた。そこで、本研究では、Opnの蛋白多型に基づく機能剖立を特異的に阻害する物質こよる膠原病治療モデルの確立を目的として今年度は以下の研究を遂行した。
1.MRL型とC3H型のOpnの立体構造の差異のUV分光法による解明
MRL型とC3H型のOpnをコムギ胚芽系を用いた無細抱蛋白合成ンステムで合成し、UV分光法による立体構造解析を行った。
2.Opn蛋白機能結合部位阻害蛋白の試作
阻害蛋白と目されるものを試作し、in vitroにて結合による機能を検索したが、現時点では市販れているRGDSアナログより強い阻害効果をしめすものを同定するには至らなかった。
3.OpnによるMφ抗原提示機能増強の機能解析と、それを阻害する糖脂質に関する解析
多型Opnを用いた解析で、MRL型のOpnのが抗原提示能を劇的にアップレギュレートし、その機能がアミノ酸多型により修飾されることを明らかにした。その機能をある糖脂質が阻害しうることを明らかにした。
4新規糖脂質を用いた糸球体腎炎治療モデル開発の萌芽的実験
上項3で見出した糖脂質を、Span80リポソームを用いたドラッグデリバリーシステムによりMRLマウスに投与し、少なくとも予防的投与により糸球体腎炎が抑制されることを明らかにした。

Research Products

• [Journal Article] Toll-like receptor 3 signaling induces chronic pancreatitis through the Fas/Fas ligand-mediated cytotoxicity. (2009)
  • Author(s): Soga Y, Komori H, Miyazaki T, Arita N, Kamada K, Nose M, et al.
  • Journal Title: Tohoku J Exp Med. 217 Pages: 175-184
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Genetic dissociation of dacryoadenitis and sialadenitis in a Sjogren' s syndrome mouse model with common and different susceptibility gene loci. (2009)
  • Author(s): Kamao T, Miyazaki T, Soga Y, Terada M, Ohashi Y, Nose M, et al.
  • Journal Title: Invest Ophthalmol Vis Sci. (in press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Expression of sphingosine kinase 2 (SPHK2)in synovial fibroblasts from patients with rheumatoid arthritis and its possible role in the regulatory mechanism (2009)
  • Author(s): Kamada K, Arita N, Tsubaki T, Miyazaki T, Nose M, et al.
  • Journal Title: Pathol Int. (in press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Therapeutic effect of CXCR3-expressing regulatory T cells on liver, lung and intestinal damages in a murine acute GVHD model. (2008)
  • Author(s): Hasegawa, H, Inoue, A, Miyazaki, T., Yoshie, O., Nose, M., Yasukawa, M., et al.
  • Journal Title: Gene Therapy 15 Pages: 171-182
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Chemokine blockade for lupus model mice. (2008)
  • Author(s): Hasegawa, H.
  • Journal Title: Front Biosci. 99 Pages: 2900-2908
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Common and different gene loci susceptible to sialoadenitis and dacryoadenitis in a sjogren's syndrome mouse model. (2008)
  • Author(s): Kamao T, Miyazaki T, Nose M, et al
  • Organizer: 6^<th> International Congress on Autoimmunity
  • Place of Presentation: Porto, Portugal.
  • Year and Date: 20080910-20080914
• [Presentation] Span80 vesicle with lectin ESA induces specific apoptosis in Colon26 tumor cell line in vivio. (2008)
  • Author(s): Miyazaki. T., Kato, K., Sakayama, K., Moriki, F., Nose M, et al.
  • Organizer: The 92nd annual meeding of German Society of Pathology
  • Place of Presentation: Berlin (Germany)
  • Year and Date: 2008-05-15