• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to project page

2007 Fiscal Year Annual Research Report

E型肝炎ウイルスの増殖機構のin vitroでの解析とE型肝炎治療薬への応用

Research Project

Project/Area Number 19590613
Research InstitutionNational Institute of Infectious Diseases

Principal Investigator

石井 孝司  National Institute of Infectious Diseases, ウイルス第二部, 主任研究官 (40280763)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 武田 直和  国立感染症研究所, ウイルス第二部, 室長 (90132894)
李 天成  国立感染症研究所, ウイルス第二部, 主任研究官 (90370957)
KeywordsE型肝炎 / E型肝炎ウイルス(HEV) / クローニング / cDNA / 感染性クローン / レプリコン / 阻害剤 / スクリーニング
Research Abstract

昨年度は、培養細胞系で増殖することができるHEVクローンの取得を試みた。ヒトおよびブタの糞便材料、ブタの肝臓から乳剤を作ってヒト肝臓由来培養細胞に接種し、長期間培養を行なった。経時的に培養上清を回収し、ELISA法を用いて培養上清中のHEV粒子量を測定したところ、感染後1ヶ月程度から抗原量の上昇が見られるサンプルを見出した。本クローンは培養細胞系で増殖性があると考えられる。RT-PCR法を用いて本クローンのcDNAをクローニングし、接続して全長クローンを作成した。定量PCR装置を用いた高感度HEV RNA測定系の確立にも成功した。本クローンよりRNAを合成し、培養細胞に導入して上記の測定系を用いて感染性かどうかの確認を行なっている。同時に感染細胞の培養上清および合成RNAをカニクイザルに接種し、本クローンの動物モデルへの感染性の検討も行っている。クローンの感染性が確認できれば、reverse geneticsの手法を用いてHEVの増殖に重要な領域を調べることが可能になる。また、全長クローンの構造蛋白をコードする領域を薬剤耐性遺伝子に置換したレプリコンを作成し、RNAを合成して培養細胞に導入し、薬剤耐性細胞が得られるかどうか確認している。レプリコン細胞を樹立することができれば、HEV増殖阻害剤のスクリーニングを本細胞を用いて行なうことができ、簡便に阻害剤のスクリーニングが行なえると考えられる。

  • Research Products

    (22 results)

All 2008 2007

All Journal Article (9 results) (of which Peer Reviewed: 8 results) Presentation (11 results) Book (1 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Journal Article] Dynamic behavior of hepatitis C virus quasispecies in a long-term culture of the three-dimensional radal-flow bioreactor system.2008

    • Author(s)
      Murakami K., et. al.
    • Journal Title

      Journal of Virological methods 148

      Pages: 174-181

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Crystallization and preliminary X-ray diffraction analysis of recombinant hepatitis E virus-like particle.2008

    • Author(s)
      Wang CY., et. al.
    • Journal Title

      Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun. 64

      Pages: 318-322

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Hepatitis C viral life cycle.2007

    • Author(s)
      Suzuki T., et. al.
    • Journal Title

      Advanced Drug Delivery Reviews 59

      Pages: 1200-1212

  • [Journal Article] Efficient regulation of viral replication by siRNA in a non-human primate surrogate model for hepatitis C.2007

    • Author(s)
      Yokota T., et. al.
    • Journal Title

      Biochemical and Biophysical Research Communications 361

      Pages: 294-300

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] NS3 helicase and NS5B to 3'X regions are important for efficient JFH-1 replication in Huh7 cells.2007

    • Author(s)
      Murayama A., et. al.
    • Journal Title

      Journal of Virology 81

      Pages: 8030-8040

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Enhancement of cytotoxicity against Vero E6 cells persistently infected with SARS-CoV by Mycoplasma fermentans.2007

    • Author(s)
      Mizutani T., et. al.
    • Journal Title

      Archives of Virology 152

      Pages: 1019-1025

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] GBV-B as a pleiotropic virus:Distribution of GBV-B in extrahepatic tissues in vivo.2007

    • Author(s)
      Ishii K., et. al.
    • Journal Title

      Microbes and Infection 9

      Pages: 515-521

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Prevalence of antibody to hepatitis E virus among wild sika deer,Cervus nippon,in Japan.2007

    • Author(s)
      Matsuura Y., et. al.
    • Journal Title

      Archives of Virology 152

      Pages: 1375-1381

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Detection of hepatitis E virus RNA from the bivalve Yamato-Shijimi(Corbicula japonica)in Japan.2007

    • Author(s)
      Li TC., et. al.
    • Journal Title

      Am J Trop Med Hyg. 76

      Pages: 170-172

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 高度弱毒化ワクチニアウイルス株DIsの組換えSARSワクチンとしての検討2007

    • Author(s)
      石井孝司、横田恭子、長谷川秀樹、永田典代、森川茂、福士秀悦、水谷哲也、鈴木哲朗、田代真人、田口文広
    • Organizer
      第11回日本ワクチン学会
    • Place of Presentation
      横浜
    • Year and Date
      20071200
  • [Presentation] 細胞培養系により産生されたHCVウイルスの免疫原性に関する検討2007

    • Author(s)
      尾見 法昭, 他
    • Organizer
      第11回日本ワクチン学会
    • Place of Presentation
      横浜
    • Year and Date
      20071200
  • [Presentation] 高度弱毒化ワクチニアウイルス株DIsの組換えSARSワクチンとしての検討2007

    • Author(s)
      石井孝司、横田恭子、長谷川秀樹、永田典代、森川茂、福士秀悦、水谷哲也、鈴木哲朗、田代真人、田口文広
    • Organizer
      第55回日本ウイルス学会
    • Place of Presentation
      札幌
    • Year and Date
      20071000
  • [Presentation] HCV JFH-1株の複製および感染性ウイルス粒子形成に重要な領域の解析2007

    • Author(s)
      村山麻子、伊達朋子、赤澤大輔、森川賢一、石井孝司、野本明男、鈴木哲朗、脇田隆字
    • Organizer
      第55回日本ウイルス学会
    • Place of Presentation
      札幌
    • Year and Date
      20071000
  • [Presentation] 遺伝子型2a/2b間でのキメラウイルスの作製および性状解析2007

    • Author(s)
      伊達朋子、村山麻子、赤澤大輔、森川賢一、石井孝司、野本明男、鈴木哲朗、脇田隆字
    • Organizer
      第55回日本ウイルス学会
    • Place of Presentation
      札幌
    • Year and Date
      20071000
  • [Presentation] C型肝炎サロゲート霊長類モデル:GBV-Bは新世界ザルに潜伏感染する2007

    • Author(s)
      岩崎 優紀, 他
    • Organizer
      第55回日本ウイルス学会
    • Place of Presentation
      札幌
    • Year and Date
      20071000
  • [Presentation] シジミからのE型肝炎ウイルス遺伝子の検出2007

    • Author(s)
      李 天成, 他
    • Organizer
      第55回日本ウイルス学会
    • Place of Presentation
      札幌
    • Year and Date
      20071000
  • [Presentation] キメラマウスにおけるE型肝炎ライルスの複製2007

    • Author(s)
      李 天成, 他
    • Organizer
      第55回日本ウイルス学会
    • Place of Presentation
      札幌
    • Year and Date
      20071000
  • [Presentation] The important regions for RNA replication and infectious virus particle formation of JFH-1.2007

    • Author(s)
      Murayama A., et. al.
    • Organizer
      14th International Meeting on HCV and Related Viruses
    • Place of Presentation
      Glasgow,Scotland
    • Year and Date
      20070900
  • [Presentation] Development of chronic GBV-B infection in marmosets with smoldering plasma viremia.2007

    • Author(s)
      Akari H., et. al.
    • Organizer
      14th International Meeting on HCV and Related Viruses
    • Place of Presentation
      Glasgow,Scotland
    • Year and Date
      20070900
  • [Presentation] 野生動物における抗E型肝炎ウイルス抗体の保有状況調査2007

    • Author(s)
      加藤 花名子, 他
    • Organizer
      第144回日本獣医学会
    • Place of Presentation
      江別
    • Year and Date
      20070900
  • [Book] E型肝炎(書籍名)食品由来感染症と食品微生物2008

    • Author(s)
      石井 孝司, 他
    • Total Pages
      6
    • Publisher
      中央法規出版
  • [Patent(Industrial Property Rights)] UVによるC型肝炎ウイルスの不活化方法2007

    • Inventor(s)
      石井 孝司, 他3名
    • Industrial Property Rights Holder
      同左
    • Industrial Property Number
      2007-167916
    • Filing Date
      2007-06-26

URL: 

Published: 2010-02-04   Modified: 2016-04-21  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi