2008 Fiscal Year Annual Research Report
白血病における接着シグナル分子Rho GTPaseの役割
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19591105
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
勝見 章 Nagoya University, 大学院・医学系研究科, 特任講師 (80378025)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
貝淵 弘三 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (00169377)
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| Keywords | RhoH / 急性骨髄性白血病 / 予後因子 / 細胞接着 / Rac / Bad |
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| Research Abstract |
RhoHの急性骨髄性白血病における生物学的機能の解明のため、以下の実験を施行した。
1)名古屋大学医学部附属病院ならびに関連施設における成人急性骨髄性白血病(AML)90例の白血病細胞のRhoH発現量をTaqMan PCR法で定量した。RhoH発現はFAB分類、年齢、初診時白血球数、寛解導入率、染色体異常の有無に無関係であった。RhoH transciptsの中央値である1.57copies/μg RNAをカットオフ値としてRhoH低発現群と高発現群に分けて予後を検討したところ、低発現群では高発現群と比較して有意に予後不良であった。また多変量解析にて、RhoH低発現は無病生存率において予後不良因子であった。
2)32D細胞、HL60細胞にRhoH cDNA, empty vectorをレトロウイルスで導入し、VLA4 (α4β1インテグリン)の活性に及ぼすRhoHの影響をFACSを用いたVCAM-1アッセイで定量した。この結果、RhoH発現の有無はVLA4の活性に影響を与えなかった。
3)COS7細胞にRhoHを過剰発現させた状態ではsmall GTPase Racが不活性化することが明らかになった。またRac-PAKの下流に存在するBadのS112のリン酸化を測定したところ、RhoH発現によりBad S112のリン酸化が抑制される事が明らかになった。
RhoHは骨髄系細胞での主要なインテグリンであるVLA4活性には影響を及ぼさなかったことから、細胞接着への関与は少ないものと推測された。その一方でRhoHはRac活性を抑制する事により、その下流のBadの脱リン酸化を介して細胞に対してpro-apoptoticに作用していることが示唆された。また血球を使用したAffinity chromatographyによりRhoHの新規エフェクター探索を行った。
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