2007 Fiscal Year Annual Research Report
エピジェネティクスによる微小変化理ネフローゼ症候群の病閃解明へのアプローチ
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19591238
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| Research Institution | Gunma University |
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Principal Investigator |
森川 明廣 Gunma University, 大学院・医学系研究科, 教授 (40125878)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
荒川 浩一 群馬大学, 医学部, 講師 (50272232)
小林 靖子 群馬大学, 大学院・医学系研究科, 助教 (60451720)
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| Keywords | 微少変化型ネフローゼ症候群 / 病因 / エピジェネティクス / DNAメチル化 / ヘルパーT細胞 / マイクロアレイ / 単球 |
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| Research Abstract |
微少変化型ネフローゼ症候群(以下MCNS)は大量の蛋白尿を呈する疾患であり,その病因はT細胞の機能異常であるという仮説が提唱されてきたが,詳細は解明されていない。本研究はマイクロアレイによるゲノムワイドなメチル化解析法(Microarray-based Integrated Analysis of Methylation by Isoschizomers(MIAM工)法)を用いて,MCNS再発時と寛解時の同一個体のゲノムDNA間でDNAメチル化の状態に差がある遺伝子座があるかを検討するものである。メチル化の状況に差のある部位を認めた場合には,遺伝子座の位置を同定し,その働きについて検討することで,MCNSの病因を探るとともに,MCNS発症のメカニズムにせまることを目的とする。
初年度は検体の収集および細胞抽出,DNA単離を下記の要領で随時おこなってきた。
1)検体の収集群馬大学附属病院および関連施設において,International Study of Kidney Diseasein Children の診断基準を満たすステロイド感受性のMCNS患者の発症時と寛解時に,倫理的側面に充分配慮して,同意の得られた患者から末梢血を採取,収集する。
2)ヘルパーT細胞,ナイーヴT細胞,単球の分離収集した末梢血は比重遠心法にて単核球を分離する。磁気ビーズ細胞分離システムを用いて,CD14陽性分画は単球として,CD14陰性分画のうちCD4陽性分画はヘルパー細胞,そのうちCD45RO一分画をナイーヴT細胞として分離し,ゲノムDNAを抽出する。
また,マイクロアレイによるゲノムワイドなメチル化解析法(MIAMI法)によるメチル化の検討は当初,再発時と寛解時のペアで検体がえられ次第解析する予定でいたが,アレイプレートの作成の都合上一度期に行うこととしたため,次年度に持ち越したい。
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Research Products
(2 results)
