人工ヒト型抗ロタウイルス中和抗体を利用した、感染防御・治療法の開発

2009 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19591266
• Research Institution: Fujita Health University
• Principal Investigator: 守口 匡子 Fujita Health University, 医学部, 講師 (60298528)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 谷口 孝喜 藤田保健衛生大学, 医学部, 教授 (40094213)
• Keywords: ファージ抗体 / HRV / ヒト型抗体 / モノクローナル / 交叉反応性 / 受動免疫 / 乳酸菌 / 中和

Research Abstract

我々はこれまでに、ファージ抗体ライブラリーから、HRVを中和するヒト型のモノクローナル抗体を12クローン単離し、代表的な3クローン(1-2H、2-3E、2-11G)の詳細な解析を行った。そして、2クローンが交叉反応性抗VP4中和抗体、1クローンがG1タイプ特異的中和抗体であること、これら3抗体が認識するVP4及びVP7上の中和エピトープは、これまで報告されているマウスの抗HRV抗体のそれらと異なること、マウスのモデル実験系においてこれら3抗体に受動免疫効果があることを確認した。更に、これら抗体の、HRV感染の場である腸管における持続的供給を目指し、乳酸菌による抗体発現系の確立を試みた。結果、上記3抗体のうちの1抗体(1-2H)のみではあるが、抗体分子発現をウエスタンブロッティング法で確認し、その精製分子による中和活性も確認でき、乳酸菌によるヒト型抗体の発現が可能であることを明らかにした。今年度は、有効な感染防御・治療には、中和抗体の種類が多いことが有利であると考え、複数種のヒト型ファージ抗体ライブラリーのスクリーニングや、同一ライブラリーの再スクリーニングを行い、新たなヒト型抗HRV中和抗体の単離を目指したが、有用な抗体を得ることはできなかった。また、上記3抗体の単離・解析の過程で得られた突然変異体の抗体価を解析したが、いずれも活性は低下しており、高力価化につながる突然変異導入の検討には課題が残る。