2007 Fiscal Year Annual Research Report
| Project/Area Number |
19591544
|
|---|
| Research Institution | Hiroshima University |
|---|
Principal Investigator |
檜井 孝夫 Hiroshima University, 大学院・医歯薬学総合研究科, 寄附講座講師 (10444689)
|
|---|
| Keywords | 大腸癌 / マウスモデル |
|---|
| Research Abstract |
本年度は2006年7月末までの勤務先で作製したCDX2P-CreマウスならびにApc floxマウスの凍結受精卵を作製し、広島大学に輸送した。学内の遺伝子組み換え生物の使用許可を受けた後、受精卵から成人マウスへ戻した。現在、広島大学で凍結受精卵を再度作製しバックアップをとるとともに、新しい飼育環境での研究体制を確立しつつある。交配したマウスから生まれて来た子マウスの尾から染色体DNAを抽出しPCR法によって遺伝子型を調べ、CDX2P-CreとApc-loxPの両方の相同遺伝子をもつマウスを実験マウス、Apc-loxPのみまたはCDX2P-Creのみをもつマウスをコントロールマウスの確認ができる環境が整った。
このような実験準備の成果をふまえ、最終年度となる来年度には、これらマウスモデルに高脂肪の食餌を与えて現在の飼育環境による影響を経時的に観察する。具体的には、生後2、4、6、8ケ月で大腸を回収し、ポリープの有無や局在、サイズなどを記録する。また得られたポリープからマイクロダイセクション法を用いてDNAの回収を行い、遺伝子異常についてPCRを使ったダイレクト・シークエンスやマイクロサテライトの不安定性などを解析、またポリープから初代培養を試みてマウスのポリープ細胞から培養細胞株の樹立を試みる。
|
