2008 Fiscal Year Annual Research Report
ES細胞および骨髄間質幹細胞の脳内共同移植療法の開発-脳出血モデルでの検討-
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19591696
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| Research Institution | Nara Medical University |
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Principal Investigator |
吉川 正英 Nara Medical University, 医学部, 准教授 (50230701)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西村 文彦 奈良県立医科大学, 医学部, 助教 (70433331)
和中 明生 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (90210989)
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| Keywords | 脳出血 / ES細胞 / 骨髄間質幹細胞 / コラゲナーゼ / 脊髄損傷 |
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| Research Abstract |
マウス石大脳にコラゲナーゼを注入して脳出血モデルを作成し、9日目に病巣部にGFP標識したマウスES細胞由来神経幹細胞(ES-NSC)10^5個およびBrdU標識した骨髄間質幹細胞(BM-MSC)10^5個を共同移植した。移植後8週間の行動学的観察の後に、近傍脳を免疫組織学的に観察した。共同移植群とES-NSCあるいはBM-MSC単独移植群の間に、行動学的改善に有意な差は認められなかったが、共同移植群ではES-NSC単独移植群に比べ多数のES細胞由来MAP2陽性細胞を認め、共同移植により病巣近傍脳におけるES由来神経細胞の分化とその生着効率が上昇することが判明した。In vitro実験では、胚様体のレチノイン酸処理により未分化ES細胞を含むES-NSC細胞分画を調整しBM-MSCと共培養を行った。共培養では、ES-NSC細胞分画からOct3/4, Utfl, Nanogなどの未分化ES細胞関連の諸遺伝子発現は早期に消失した。また、BM-MSCにNGF, GDNF, BDNFなどの神経栄養因子の遺伝子発現を確認した。BM-MSCおよびES-NSCの共同移植で、行動学的改善に有意差は無かったが、BM-MSCがES-NSCおよびその分画中に残存する未分化ES細胞の神経分化に促進的に作用し、病巣近傍に多数のES由来神経細胞を誘導させた可能性が考えられた。また、共同移植により未分化ES細胞からの腫瘍形成が抑制された可能性も示唆された。これらの成績は得て、比較的行動評価を行うことの容易な脊髄損傷マウスへのES-NSCおよびBM-MSCの共同移植に発展させた.
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