遺伝子移入骨髄幹細胞とコンドロイチナーゼABCを利用した骨髄再生

2007 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19591718
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 松山 幸弘 Nagoya University, 大学院・医学系研究科, 准教授 (20312316)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 酒井 義人 名古屋大学, 医学部附属病院, 特任助教 (70378107) ; 片山 良仁 名古屋大学, 医学部附属病院, 医員 (40378104) ; 伊藤 全哉 名古屋大学, 医学部附属病院, 医員 (50447819)
• Keywords: 骨髄間質細胞 / Nucleofection / 遺伝子導入 / 神経再生

Research Abstract

【目的】コンドロイチナーゼABCの脊髄損傷後の運動、知覚機能不全の改善作用につき明らかにすること
【方法】S.Dラットの脊髄損傷モデルを作製。クモ膜下にコンドロイチナーゼABC(0.05U/200μL)を充填した浸透圧ポンプ(Alzet osmotic pump)を使用し損傷直後から、14日間髄腔内に持続投与した。
【結果】
<後肢運動神経機能評価(BBBテスト)>コンドロイチナーゼABC投与群(以下ABC群)において、生理食塩液投与群に比して有意な後肢運動神経機能の回復を認めた。0.05U/200μLより少量あるいは増量し投与したが、0.05U/200μLが運動機能回復に置いて至適投与量であった。
<後肢運動神経機能評価(グリッドテスト)>3分間歩行させ、グリッドを下肢でグリップできた割合を%グリップ値とした。ABC群の%グリップ値は、生理食塩液投与群の%グリップ値に比して高値を示し、これらの投与群において後肢運動神経機能の回復が認められた。これらは上記BBBテストの結果を支持する結果であった。
<後肢運動神経機能評価(フットプリントテスト)>ABC群の歩幅は、生理食塩液投与群の歩幅に比して広く、これらの投与群において後肢運動神経機能の回復が認められた。
<知覚神経機能評価(熱刺激に対する作用:テイルフリックテスト)
ラットの尻尾を55℃の湯浴に浸し、尻尾を揺らすまでの時間(反応時間)を計測した。生理食塩液投与群では、損傷前に比して、損傷後、経日的に反応時間が短縮していき、熱刺激に対して過敏反応を示した。一方、ABC群では、損傷早期には生理食塩液投与群と同様の傾向を示したが、損傷3週後から5週後以降からは徐々に、熱刺激に対する過敏反応は改善し、損傷8週後には、損傷前とほぼ同程度の反応時間となり、知覚神経機能の回復が認められた。