2007 Fiscal Year Annual Research Report
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19592034
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
横井 則彦 Kyoto Prefectural University of Medicine, 医学研究科, 准教授 (60191491)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
川崎 諭 京都府立医科大学, 医学研究科, 助教 (60347458)
松田 彰 京都府立医科大学, 医学研究科, 助教 (00312348)
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| Keywords | miRNA / エピジェネティクス / メチル化 / 機能的RNA / 角膜上皮細胞 |
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| Research Abstract |
麻酔薬の過剰投与により屠殺したGFPラットより眼窩外涙腺を摘出した。この涙腺をトリプシン/EDTA溶液にて分散させ、培養皿上に播種し、5%CO_2で37℃のインキュベータ内にて各種培養液で培養を行った。10%FBS/DMEMでは培養開始11日目でコンフルエントになり、敷石状の細胞、紡錘状の細胞および重層化している細胞が観察された。SHEM(10%FBS, 10ng/mL recombinant human EGF, 5μg/mL Insulin, 0.1μg/mL cholera Toxin)では一部に敷石状の構造が認められたが、多くの細胞が線維芽細胞様の紡錘形の形態を示した。一方、低Ca^<2+>濃度のdefined Keratinocyte-SFMで培養したところ、細胞はコロニー状に増殖し、コロニー内では小型の細胞が敷石状に観察され、コロニー外のプレート上には線維芽細胞様の細胞が散見された。これらの結果から、低Ca^<2+>濃度のdefined k-SFMの培養では主に涙腺上皮細胞が未分化な状態を維持しながら、培養出来ることが判明した。また涙腺上皮細胞の3次元培養法を検討するため、GFP-のラットより調製したファイブロブラストと共にGFPラットより調製した涙腺細胞をアテロコラーゲン中に分散して培養したところ、一部のGFP陽性の細胞はアテロコラーゲン内で増殖することが確認された。一部の涙腺細胞は3次元の立体構造を構築する可能性が示唆された。
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[Journal Article] Methodologies to diagnose and monitor dry eye disease: Report of the diagnostic methodology subcommittee of the international dry eye workshop2007
Author(s)
Bron AJ, Abelson MB, Ousler G, Pearce E, Tomlinson A, Yokoi N, Smith JA, Begley C, Caffery B, Nichols K, Schaumberg D, Schein O, Calonge M, Baudouin C, Goto E, Grus F, Paugh J
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Journal Title
Ocul Surf 5
Pages: 108-152
Peer Reviewed
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