G→Cトランスバージョンを引き起こすグアニン酸化損傷の検出法の開発

2008 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19710052
• Research Institution: Tokushima Bunri University
• Principal Investigator: 喜納 克仁 Tokushima Bunri University, 香川薬学部, 講師 (70360534)
• Keywords: グアニン酸化損傷 / 紫外線 / G→Cトランスバージョン

Research Abstract

DNAは化学物質であるために様々な物質・エネルギーと反応し、遺伝情報の変異を引き起こす。この変異が積み重なると最終的に癌や老化を引き起こす。空然変異の中でも最も単純な点突然変異は12通り存在し,そのうちグアニンからジトシンへの変異(G→Cトランスバージョン)のみが最近まで不明であった。我々は最近まで発生機構が不明であったG→Cトランスバージョンを優位に引き起こすDNA酸化損傷オキサゾロン(Oz)を見いだした。G→Cトランスバージョンはがん細胞におけるras遺伝子やp53遺伝子の点突然変異で見られる上、光増感反応やいくつかの酸化剤を用いた反応においても優位に起こる点突然変異である。G→CトランスバージョンをひきおこすOzが容易に検出できれば、細胞がガン発生のプレ状態にあるか否かを判別できる可能性がある。そこで我々はOzを固相担体に結合させ、40塩基のランダム配列を含んだDNAライブラリーからDNAおよびRNAアプタマーをSELEX法で選択した。しかしながら、選択されてきたDNAおよびRNAアプタマーはブリーのOzに全く結合しなかった。そこで本年度、フリーのOzに結合するアプタマーを得ることができるよう、Ozと固相担体の間のリシカーを工夫し、昨年度と同様にSELEX法でDNAおよびRNAアプタマーを選択した。その結果、得られたDNAおよびRNAアプタマーは、解離定数が0.3microM以上のものであった。本年度得られた知見をもとに今後、より綿密な分手設計をした上でOz結合固相担体を合成することで、Ozに対してより結合能の強いアプタマーを得たいと考えている。

Research Products

• [Journal Article] The oxidation of 8-oxo-7, 8-dihydroguanine by iodine. (2010)
  • Author(s): Kino, K., Morikawa, M., Kobayashi, T., Kobayashi T., Komori, R., Sei, Y., Miyazawa, H.
  • Journal Title: Bioorg.Med.Chem.Lett. 20(in press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] フラビン誘導体の光分解生物とグアニン光酸化反応 (2010)
  • Author(s): 喜納克仁、小林輝彦、有馬英治、小森理絵、小林隆信、宮澤宏
  • Journal Title: ビタミン 84 Pages: 59-60
• [Journal Article] Eukaryotic DNA polymerases alpha, beta and epsilon incorporate guanine opposite 2 ,2, 4-triamino-5(2H)-oxazolone. (2009)
  • Author(s): Kino, K., Sugasawa, K., Mizuno, T., Bando, T., Sugiyama, H., Akita, M., Miyazawa, H., Hanaoka, F.
  • Journal Title: ChemBioChem 10 Pages: 2613-2616
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Photoirradiation products of flavin derivatives, and the effects of photooxidation on guanine. (2009)
  • Author(s): Kino, K.. Kobayashi, T., Arima, E., Komori, R., Kobayashi T., Miyazawa, H.
  • Journal Title: Bioorg.Med.Chem.Lett. 19 Pages: 2070-2074
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A new small molecule that directly inhibits the DNA binding of NF-kB. (2009)
  • Author(s): Kobayashi, T., Yoshimori, A., Kino. K.., Komori, R., Miyazawa, H., Tanuma, S.
  • Journal Title: Bioorg.Med.Chem. 17 Pages: 5293-5297
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The oxidation of 2'-deoxy-8-oxoguanosine by iodine. (2009)
  • Author(s): Morikawa, M., Kobayashi, T., K obayashi, T., Komori, R., Sei, Y., Miyazawa, H., Kino, K..
  • Journal Title: Nucleic Acids Sym.Ser. 53 Pages: 219-220
• [Journal Article] A new preparations of guanine photo-oxidation products. (2009)
  • Author(s): Kino, K., Morikawa, M., Kobayashi, T., Kobayashi T., Komori, R ., Sei, Y., Miyazawa, H.
  • Journal Title: Photomed. Photobiol. 31 Pages: 5-6
• [Presentation] オキサゾロンの点突然変異能 (2010)
  • Author(s): 喜納克仁
  • Organizer: 日本化学会第90春季年会(2010)
  • Place of Presentation: 大阪
  • Year and Date: 2010-03-27
• [Presentation] ヨウ素による80xoG酸化生成物の分子量測定 (2010)
  • Author(s): 森川雅行、小林輝彦、小林隆信、小森理絵、清悦久、宮澤宏、喜納克仁
  • Organizer: 日本化学会第90春季年会(2010)
  • Place of Presentation: 大阪
  • Year and Date: 2010-03-27
• [Presentation] Ab initio calculation of base pairs containing oxazolone. (2009)
  • Author(s): Kino K, Kobayashi T., Komori R., Miyazawa H.
  • Organizer: 日本環境変異原学会第38回大会
  • Place of Presentation: 静岡
  • Year and Date: 20091100
• [Presentation] グアニン光酸化生成物の新規生成反応とその解析 (2009)
  • Author(s): 喜納克仁、森川雅行、小林輝彦、小森理絵、小林隆信、清悦久、宮澤宏
  • Organizer: 第31回日本光医学・光生物学会
  • Place of Presentation: 大阪
  • Year and Date: 20090700
• [Presentation] ヨウ素による8オキソグアニンの酸化反応 (2009)
  • Author(s): 喜納克仁、森川雅行、小林輝彦、小森理絵、小林隆信、清悦久、宮澤宏
  • Organizer: 第12回ヨウ素学会シンポジウム
  • Place of Presentation: 千葉
  • Year and Date: 2009-10-29
• [Presentation] The oxidation of 2'-deoxy-8-oxoguanosine by iodine. (2009)
  • Author(s): Morikawa, M., Kobayashi, T.Kobayashi, T., Komori, R., Sei, Y., Miyazawa, H., Kino, K
  • Organizer: The 6th International Symposium on Nucleic Acids Chemistry, 2009 (36th Symposium on Nucleic Acids Chemistry)
  • Place of Presentation: Takayama, Japan
  • Year and Date: 2009-09-28
• [Remarks]
  • URL: http://kp.bunri-u.ac.jp/kph04/index.html