2009 Fiscal Year Annual Research Report
ユビキチンリガーゼSCF Fbs複合体構造解析による糖蛋白質分解品質管理機構解析
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19770080
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
水島 恒裕 Nagoya City University, 大学院・薬学研究科, 准教授 (90362269)
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| Keywords | ユビキチン / 糖鎖 / SCFユビキチンリガーゼ / 蛋白質分解 / 品質管管理 |
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| Research Abstract |
ユビキチンープロテアソームタンパク質分解経路は細胞内において不要なタンパク質を特異的に分解することにより、生体内の機能を正常な状態に維持している。SCF^<Fbs1>は小胞体関連分解系において立体構造異常な糖タンパク質や余剰サブユニットにユビキチンを付加し分解系へと導く働きを持つ。高等動物ではFbs1とホモロジーの高いFbs2、Fbg3などが存在しており、生体内ではそれらが共同して糖タンパク質の品質管理を行っている。また、近年Fbs1はユビキチンリガーゼの働きだけではなく、糖タンパク質のシャペロンとしての機能が報告されており、これらのタンパク質の構造学的な研究は重要である。これまでにFbs1の立体構造を決定し糖鎖認識機構を明らかにしたことから、Fbs2、Fbg3による基質認識特異性の発現機構の解明、および機能の解析を目指し、Skp1-Fbs2複合体、Skp1-FBG3複合体の結晶化を行った。
その結果、Skp1-FBG3の結晶化ではシーディングを繰り返すことにより、分解能2.6Aの回折データの収集、構造決定に成功した。決定した構造よりFbg3の立体構造は全体としてFbs1と類似していたが、基質認識部位に違いがみられた。また、Skp1-Fbs2複合体の結晶化では発現系、精製条件の検討を行い結晶化に成功した。しかし、得られた結晶は結晶格子が大きく回折データ収集が困難なものであった。そのため、データ収集を行うと共に結晶化条件の検討を行い、構造解析を進めている。
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[Journal Article] Structural basis for the cooperative interplay between the two causative gene products of combined factor V and factor VIII deficiency2010
Author(s)
Nishio M, Kamiya Y, Mizushima T, Wakatsuki S, Sasakawa H, Yamamoto K, Uchiyama S, Noda M, McKay AR, Fukui K, Hauri HP, Kato K
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Journal Title
Proc Natl Acad Sci USA. 107
Pages: 4034-4039
Peer Reviewed
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