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2007 Fiscal Year Annual Research Report

腎マクラデンサ細胞におけるシグナル伝達の分子機構解明

Research Project

Project/Area Number 19790169
Research InstitutionKitasato University

Principal Investigator

安岡 有紀子  Kitasato University, 医学部, 助教 (50348504)

Keywordsマクラデンサ / 尿細管糸球体フィードバック機構 / nNOS / Na^+-K^+-2Cl^-輸送体 / フロセミド
Research Abstract

尿細管糸球体フィードバック機構(TGF)は、レニンーアンジオテンシンーアルドステロン系とは独立に尿中へのNa^+喪失を回避する腎臓固有のシステムである。TGFシステムを構成している細胞群は、糸球体近接装置(jaxtaglomerularapparatus, JGA)と呼ばれ、マクラデンサ(MD)は濾液中の塩濃度([CL^-])費変化を感知し、糸球体濾過量(GFR)を増減する液性シグナルを分泌する。塩濃度([Cl^-])変化を感知するのは、MD細胞管腔膜に発現するNa^+-k^+-2cl^-輸送体(NKCC2)であると考えられている。MD細胞株(NE-MD)は、NKCC2阻害薬であるフロセミド添加により、時間・Ca^2+依存的にnNOS蛋白の発現量およびNO産生量を増加させた。しかし、フロセミド誘導nNOS蛋白(約60 kDa)は、脳や骨格筋のnNOS(約160 kDa)と比べて小さかったため、本年度はこのMD-nNOS蛋白のmRNA配列の同定およびタンパク構造解り〒を行った。方法としては、mRNAの配列を調べるためのRT-PCR法と、蛋白の分子構造を調べるための二次元電気泳動およびMALDI-TOF-MS解析を行った。結果、RT-PCR法ではexonの前半部分のみが増えた。また、MALDI-TOFMAS解析では、脳型nNOS蛋白(酸化型ドメイン+還元型ドメイン)と比較するとC末端側(還元型ドメイン)が欠落しており、抗C末端ペプチド抗体を使用したWestern blotting の結果と総合して、還元型ドメインの大半が欠失している可能性を示唆した。この特異な構造が、MD-nNOSの[C1-]依存性発現と関連し、TGF機構の分子基盤の一端を担っていると考えられる。

  • Research Products

    (12 results)

All 2008 2007

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (10 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Regiilation of cyclooxygenase-2 (COX-2)expression in culturedmouse macula densa cells.2007

    • Author(s)
      Lisa Akiba
    • Journal Title

      Kitasato Med J 37

      Pages: 16-21

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Faint expression of aquaporin (AQP)-1 may explain low water permeability at the luminal membrane of a mouse macula densacells.2008

    • Author(s)
      川田 英明
    • Organizer
      第84回日本生理学会
    • Place of Presentation
      新宿
    • Year and Date
      20080300
  • [Presentation] Regulation of cyclooxygeiiase-2 (COX-2)expression in mousemacula densa cells.2008

    • Author(s)
      福田 英一
    • Organizer
      第84回日本生理学会
    • Place of Presentation
      新宿
    • Year and Date
      20080300
  • [Presentation] Furosemide -inducible expression and activity of neuronal nitricoxide synthase (nNOS)of the mouse macula densa cell line.2008

    • Author(s)
      河原 克雅
    • Organizer
      第84回日本生理学会
    • Place of Presentation
      新宿
    • Year and Date
      20080300
  • [Presentation] A unique molecular structure of neuronal nitric oxide synthase (nNOS)ofthe mouse macula densa ceU line (NE-MD) may explain distalflow-dependent expression.2007

    • Author(s)
      河原 克雅
    • Organizer
      国際腎臓学会
    • Place of Presentation
      ウィーン
    • Year and Date
      20071200
  • [Presentation] Furosemide induced neuronal nitric oxide synthase of the mouse maculadensa cell line lacks a C-tenninal reductase domain, but generates nitricoxide.2007

    • Author(s)
      川田 英明
    • Organizer
      アメリカ腎臓学会
    • Place of Presentation
      サンフランシスコ
    • Year and Date
      20071100
  • [Presentation] Expression of aquaporin-1 in a newly established cell line of mouse maculadensa.2007

    • Author(s)
      川田 英明
    • Organizer
      第5回アクアポリン国際会議
    • Place of Presentation
      奈良
    • Year and Date
      20070700
  • [Presentation] ME-MD細胞におけるNa^+輸送関連分子の発現解析2007

    • Author(s)
      安岡 有紀子
    • Organizer
      第50回日本腎臓学会
    • Place of Presentation
      浜松
    • Year and Date
      20070500
  • [Presentation] 細胞外(NaCl)低下によるマクラデンサ細胞nNOSの発現と活性調節2007

    • Author(s)
      川田 英明
    • Organizer
      第50回日本腎臓学会
    • Place of Presentation
      浜松
    • Year and Date
      20070500
  • [Presentation] 腎マクラデンサ細胞におけるシクロオキシゲナーゼ2(COX-2)発現調節機構2007

    • Author(s)
      福田 英一
    • Organizer
      第50回日本腎臓学会
    • Place of Presentation
      浜松
    • Year and Date
      20070500
  • [Presentation] マクラデンサと尿糸球体フィードバック機構2007

    • Author(s)
      河原克雅、安岡有紀子、川田英明、福田英一
    • Organizer
      第50回日本腎臓学会
    • Place of Presentation
      浜松
    • Year and Date
      2007-05-26
  • [Book] Annual Review 2008 腎臓-マクラデンサ細胞とTGF機構2008

    • Author(s)
      河原克雅
    • Total Pages
      219-226
    • Publisher
      中外医学社

URL: 

Published: 2010-02-04   Modified: 2016-04-21  

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