2009 Fiscal Year Annual Research Report
筋ジストロフィー症の発症に関わる糖鎖合成酵素の機能解析とその破綻
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19790244
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| Research Institution | Tokyo Metropolitan Geriatric Hospital and Institute of Gerontology |
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Principal Investigator |
萬谷 啓子 地方独立行政法人東京都健康長寿医療センター(東京都健康長寿医療センター研究所), 東京都健康長寿医療センター研究所, 研究員 (70415496)
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| Keywords | 筋ジストロフィー / ο-マンノース型糖鎖 / POMT / α-ジストログリカン |
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| Research Abstract |
α-DGは糖鎖を介してラミニンなどの基底膜の分子に結合し神経や筋組織を正常に保つ。α-DGの主要糖鎖であるο-マンノース型糖鎖の生合成を担う糖転移酵素POMT1、POMT2は先天性筋ジストロフィーの原因遺伝子産物である。POMTの酵素活性の発現にはPOMT1-POMT2複合体の形成が必要である。今年度は、昨年度に引き続き、POMTの複合体形成や活性発現機構におけるN型糖鎖の役割について検討した。
変異体の解析からPOMT1では3ヶ所、POMT2では5ヶ所のAsnで糖鎖修飾が確認されている。POMT1またはPOMT2の一方のAsnをGlnに1ヶ所置換しても、POMT活性にはほとんど影響しないが、どちらか一方のAsnをすべてGlnに置換してN結合型糖鎖を欠失させると、複合体は形成されるものの不溶性となり、POMT活性が完全に消失することが分かった。また、糖鎖修飾阻害剤のツニカマイシンで、N型糖鎖の修飾を阻害した場合も同様に不溶性となりPOMT活性は消失した。これらの結果から、POMT1とPOMT2のN型糖鎖はPOMT活性に必要であることが明らかとなった。さらに、N型糖鎖をエンドグリコシダーゼHで処理したところ、POMT1とPOMT2の分子量が低下したことから、POMT1とPOMT2には高マンノース型糖鎖が結合している、つまり小胞体に局在していることが示唆された。これは、以前の免疫染色の結果と一致していた。
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Research Products
(4 results)
