2008 Fiscal Year Annual Research Report
Notchシグナルによる膵内分泌細胞発生機構の解明と再生医療への応用
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19790646
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
藤倉 純二 Kyoto University, 医学研究科, 助教 (70378743)
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| Keywords | 膵臓 / Notchシグナル / Rbp-j / Ptf1a(p48) / 糖尿病 / ノックアウトマウス |
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| Research Abstract |
【目的】Notch/Rbp-jシグナルは、膵前駆細胞における増殖・分化のバランスを調節しており、膵特異的Rbp-jノックアウトマウスでは、膵上皮細胞の増殖低下と、内分泌細胞の早期分化や外分泌細胞の分化遅延を認める。今回、より詳細なメカニズムを知るために、培養細胞を用いてNotch/Rbp-jシグナルと膵発生関連転写因子との相互作用を検討した。
【方法】マウス由来膵上皮細胞株へ、Notch/Rbp-jシグナル関連遺伝子(Rbp-j,Rbp-L,Hes1)及び膵発生関連転写因子(Pdx1, Ptf1a, Neurogenin3)を発現するベクターをトランスフェクションし、薬剤選択後蛋白を採取し、Westernプロットにより各々の蛋白量の変化を検討した。
【成績】Rbp-jはRbp-LやHes1の発現を増加させた。Rbp-LはHes1の発現を増加させたがRbp-jの発現に変化はなかった。Hes1はRbp-jの発現を低下させるとともにRbp-Lの発現を上昇させた。Pdx1はRbp-jの発現を上昇させたが、Rbp-LやHes1の発現を低下させた。Ptf1aはRbp-jとPdxlの発現を低下させ、Rbp-LとHes1の発現を増加させた。Neurogenin3はRbp-jの発現を低下させ、Rbp-LとHes1の発現を増加させた。
【結論】膵細胞において、Notch/Rbp-jシグナルと膵発生関連転写因子との間に相互作用があることが示唆され、膵発生再生医療を可能にする上で重要な知見であると考えられた。
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