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2007 Fiscal Year Annual Research Report

JNKシグナル系による骨代謝制御機構の解析

Research Project

Project/Area Number 19791019
Research InstitutionTokyo Medical and Dental University

Principal Investigator

中村 貴  Tokyo Medical and Dental University, 難治疾患研究所, 助教 (80431948)

KeywordsJNK / MAPキナーゼ / ノックアウトマウス / Sekl / Mkk4
Research Abstract

今年度は、時期組織特異的遺伝子破壊に用いるfloxed SEK1遺伝子改変マウスの作成を試みた。具体的には、E14K ES細胞をフィーダー細胞非存在下にて純粋培養し、1290laゲノムDNAを抽出、PCR法を用いてSEK1/MKK4遺伝子断片を取得した。取得したSEK1/MKK4遺伝子断片に、loxP配列・ネオマイシン耐性遺伝子を組み込み、ネガティブ選択マーカーとしてDTA遺伝子を加え、floxed SEK1/MKK4遺伝子ターゲティングベクターを構築した。構築したベクターをE14K ES細胞にエレクトロポレーション法を用いて遺伝子導入し、G418存在下で1週間に渡って培養、G418耐性コロニーを得た。各々のコロニーからゲノムDNAを抽出し、PCR法・サザンブロッティング法にて相同組換え体ESクローンを同定した。各クローンをC57BL/6の胚盤胞ヘインジェクション法により導入、floxed SEK1/MKK4キメラマウスを得た。現在、生殖細胞系への移行を確認するため野生型マウスとの交配を行っている。

  • Research Products

    (4 results)

All 2007

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 4 results)

  • [Journal Article] Estrogen prevents bone loss via estrogen receptor alpha and induction of Fas ligand in osteoclasts2007

    • Author(s)
      Takashi Nakamura, et. al.
    • Journal Title

      Cell 130

      Pages: 811-823

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A histone lysine methyltransferase activated by non-canonical Wnt signaling suppresses PPAR-gamma transactivation2007

    • Author(s)
      Ichiro Takada, et. al.
    • Journal Title

      Nature Cell Biology 9

      Pages: 1273-1285

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Strain-dependent embryonic lethality and exaggerated vascular remodeling in heparin cofactor II-deficient mice2007

    • Author(s)
      Ken-ichi Aihara, et. al.
    • Journal Title

      Journal of Clinical Investigation 117

      Pages: 1514-1526

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] DEAD-box RNA helicase subunits of the Drosha complex are required for processing of rRNA and a subset of MicroRNAs2007

    • Author(s)
      Toru Fukuda, et. al.
    • Journal Title

      Nature Cell Biology 9

      Pages: 604-611

    • Peer Reviewed

URL: 

Published: 2010-02-04   Modified: 2016-04-21  

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