2008 Fiscal Year Final Research Report
The analysis of DNA polymerase activities by using the single molecule observation techniques
| Project/Area Number |
19870003
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Molecular biology
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| Research Institution | Gunma University |
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Principal Investigator |
OSHIGE Masahiko Gunma University, 大学院・工学研究科, 准教授 (00451716)
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| Project Period (FY) |
2007 – 2008
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| Keywords | DNA / 酵素 / 1分子解析 / 表面修飾 / 固定技術 |
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| Research Abstract |
1分子DNAおよびタンパク質の精密解析を行うために、蛍光顕微鏡視野内で反応を1分子レベルでの測定技術を確立し、解析することを目的とし研究を実施した。
各種DNA合成酵素の単位時間当たりの合成速度計測を行った結果、TaqDNAポリメラーゼは800-900塩基/分、T7DNAポリメラーゼは3000-3200塩基/分、DNAポリメラーゼIは1000-1100塩基/分、DNAポリメラーゼβは2000-2100塩基/分となった。また、DNA合成反応を観察するための1本鎖DNA領域の可視化に成功した。方法は、DNA複製因子AのDNA結合部位と黄色蛍光タンパク質の融合タンパク質を使用することにより1本鎖DNAを安定的に可視化することが可能となった。
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