• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to project page

2020 Fiscal Year Annual Research Report

化学物質による水棲哺乳類細胞内受容体シグナル撹乱と感受性を規定する分子機構の解明

Research Project

Project/Area Number 19H01150
Research InstitutionEhime University

Principal Investigator

岩田 久人  愛媛大学, 沿岸環境科学研究センター, 教授 (10271652)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 国末 達也  愛媛大学, 沿岸環境科学研究センター, 教授 (90380287)
石橋 弘志  愛媛大学, 農学研究科, 准教授 (90403857)
Project Period (FY) 2019-04-01 – 2024-03-31
Keywords感受性 / 細胞内受容体 / オミックス / 水棲哺乳類 / 化学物質 / 繊維芽細胞 / 有機ハロゲン化合物
Outline of Annual Research Achievements

今年度の成果は主に以下の3点である。
1)日本沿岸に漂着・座礁した鯨類11種の脂皮を対象に、ガスクロマトグラフ-四重極質量分析計(GC-MS) でスクリーニング分析を実施し、蓄積している有機ハロゲン化合物の同定を試みた。その結果、得られたトータルイオンクロマトグラムから有機ハロゲン化合物と思われるピークを約300種類確認した。検出数は人為起源が最も多く、次いで未知物質・天然起源物質が続いた。検出された化合物のうち約16%が未知物質であった。
2)瀬戸内海に座礁したスナメリ(Neophocaena asiaeorientalis)の線維芽細胞を用いた新しいin vitro細胞毒性アッセイ法を確立した。スナメリ線維芽細胞をポリ塩化ビフェニル(PCB)、ジクロロジフェニルトリクロロエタンとその代謝物(DDT)を含む17種類の環境汚染物質で処理し、細胞毒性・生存率・アポトーシスを評価した。スナメリ線維芽細胞の結果は、ヒト線維芽細胞の結果と比較した。試験化合物のEC50がスナメリとヒトの細胞で有意に相関していたことから、試験化合物の相対的な効力は両種間で同等であることがわかった。瀬戸内海のスナメリの組織に蓄積していたPCBとDDTの濃度は、本研究で得られた細胞毒性の50%影響濃度(EC50)値を上回ったことから、瀬戸内海のスナメリは、PCBとDDTの蓄積が細胞レベルで悪影響を及ぼす可能性が高いことが明らかになった。
3)ホッキョクグマ(Ursus maritimus)の芳香族炭化水素受容体(AHR)のcDNAクローンを単離することに成功した。さらにin vitroレポーター遺伝子アッセイにより、ダイオキシン類によるAHR依存的転写活性化能を測定した。またin silicoドッキングシミュレーションにより、ダイオキシン類と相互作用するAHRのアミノ酸残基を予想した。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

昨年度までは、バイカルアザラシ(Pusa sibirica)のアザラシペルオキシソーム増殖因子活性化受容体(PPAR)・エストロゲン受容体(ER)を対象とし、環境汚染物質群(エクスポゾーム)とこれら細胞内受容体の相互作用を解析した。In vitroレポーター遺伝子アッセイ(iv-RGA)系やin vitro 競合結合アッセイ系により各細胞内受容体の活性化能を測定した。またバイカルアザラシの各臓器・組織で検出された環境汚染物質と細胞内受容体の相互作用のモードと強さをin silicoドッキングシミュレーションで定量的に解析した。このドッキングシミュレーションの結果はin vitroアッセイの結果を支持した。
今年度は、日本沿岸に漂着・座礁した鯨類を対象に、ガスクロマトグラフ-四重極質量分析計(GC-MS) でスクリーニング分析を実施し、蓄積している有機ハロゲン化合物の同定を試みた。その結果、未同定の物質も含め、有機ハロゲン化合物と思われるピークが数多く確認された。さらに、瀬戸内海に座礁したスナメリ(Neophocaena asiaeorientalis)の線維芽細胞を用いた新しいin vitro細胞毒性アッセイ法を確立した。瀬戸内海のスナメリの組織に蓄積していたPCBとDDTの濃度は本研究で得られた繊維芽細胞毒性の50%影響濃度(EC50)値を上回ったことから、瀬戸内海のスナメリは、PCBとDDTの蓄積が細胞レベルで悪影響を及ぼす可能性が高いことが明らかになった。加えて、ホッキョクグマ(Ursus maritimus)の芳香族炭化水素受容体(AHR)のiv-RGAにより、ダイオキシン類によるAHR依存的転写活性化能を測定した。
これらの結果は、今年度までの研究実施計画の内容をほぼ網羅していることから、本研究課題は「おおむね順調に進展している」と判断した。

Strategy for Future Research Activity

多様な水棲哺乳類の臓器・組織を試料とし、エクスポゾーム(化学物質曝露の全体像)解析を進める。エクスポゾーム対象化学物質として、新・旧残留性有機汚染物質(Persistent Organic Pollutants: POPs)・内分泌かく乱化学物質・医薬品類・生活関連物質・有機リン系難燃剤などを測定する。このほか、これまで未同定であった新規環境汚染物質を対象に、二次元ガスクロマトグラフ-飛行時間型高分解能質量分析計(GC×GC-HRTOFMS)を駆使して、ノンターゲット(測定対象物質を限定しない)分析技術の開発にも取り組む。
また、水棲哺乳類の各臓器・組織で検出された環境汚染物質と水棲哺乳類の各細胞内受容体の相互作用をin vitro実験により定量的に測定し、相互作用の種類と強さをin silicoドッキングシミュレーションで解析する。さらに水棲哺乳類の細胞へ曝露試験をおこなう。曝露試験には、野生個体の各組織から単離した初代培養細胞もしくは線維芽細胞を用いる。曝露した細胞については、トランスクリプトーム・プロテオーム解析に供する。細胞内受容体発現依存的かつ化学物質曝露量依存的にmRNA・タンパク質の発現量の変動が認められた遺伝子群については、「化学物質-遺伝子・タンパク質-疾患」の関係を予測するため、バイオインフォマティクスオンラインツールを利用して、転写因子・パスウェイ・ネットワーク・疾患のエンリッチメント解析をおこなう。この解析によって、細胞内受容体シグナル伝達系撹乱に起因する疾患(影響)を予測する。加えて今年度は同一種の野生個体群から数十検体の凍結試料を対象に、化学物質蓄積濃度・トランスクリプトーム・プロテオームを解析する。次いで、これら解析で得られた化学物質濃度とmRNA・タンパク質発現量の関係を相関分析する。

  • Research Products

    (22 results)

All 2021 2020 Other

All Int'l Joint Research (1 results) Journal Article (10 results) (of which Int'l Joint Research: 10 results,  Peer Reviewed: 10 results) Presentation (6 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Invited: 1 results) Book (1 results) Remarks (4 results)

  • [Int'l Joint Research] Kyung Hee University(韓国)

    • Country Name
      KOREA (REP. OF KOREA)
    • Counterpart Institution
      Kyung Hee University
  • [Journal Article] 2,3,7,8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin prompted differentiation to CD4+CD8-CD25+ and CD4+CD8+CD25+ Tregs and altered expression of immune-related genes in the thymus of chicken embryos2021

    • Author(s)
      Cho Min-Kyung、Park Jae-Gon、Iwata Hisato、Kim Eun-Young
    • Journal Title

      Ecotoxicology and Environmental Safety

      Volume: 211 Pages: 111947~111947

    • DOI

      10.1016/j.ecoenv.2021.111947

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Effects of tris(2-chloroethyl) phosphate exposure on chicken embryos in a shell-less incubation system2021

    • Author(s)
      Kanda Kazuki、Ito Shohei、Koh Dong-Hee、Kim Eun-Young、Iwata Hisato
    • Journal Title

      Ecotoxicology and Environmental Safety

      Volume: 207 Pages: 111263~111263

    • DOI

      10.1016/j.ecoenv.2020.111263

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Interspecies differences in cytochrome P450-mediated metabolism of neonicotinoids among cats, dogs, rats, and humans2021

    • Author(s)
      Khidkhan Kraisiri、Ikenaka Yoshinori、Ichise Takahiro、Nakayama Shouta M.M.、Mizukawa Hazuki、Nomiyama Kei、Iwata Hisato、Arizono Koji、Takahashi Keisuke、Kato Keisuke、Ishizuka Mayumi
    • Journal Title

      Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology

      Volume: 239 Pages: 108898~108898

    • DOI

      10.1016/j.cbpc.2020.108898

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Effects of prenatal bisphenol A exposure on the hepatic transcriptome and proteome in rat offspring2020

    • Author(s)
      Nguyen Hoa Thanh、Yamamoto Kimika、Iida Midori、Agusa Tetsuro、Ochiai Mari、Guo Jiahua、Karthikraj Rajendiran、Kannan Kurunthachalam、Kim Eun-Young、Iwata Hisato
    • Journal Title

      Science of The Total Environment

      Volume: 720 Pages: 137568~137568

    • DOI

      10.1016/j.scitotenv.2020.137568

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Assessment of Risks of Dioxins for Aryl Hydrocarbon Receptor-Mediated Effects in Polar Bear (Ursus maritimus) by in Vitro and in Silico Approaches2020

    • Author(s)
      Hwang Ji-Hee、Kannan Kurunthachalam、Evans Thomas J.、Iwata Hisato、Kim Eun-Young
    • Journal Title

      Environmental Science & Technology

      Volume: 54 Pages: 1770~1781

    • DOI

      10.1021/acs.est.9b05941

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] De novo transcriptomic analysis predicts the effects of phenolic compounds in Ba River on the liver of female sharpbelly (Hemiculter lucidus)2020

    • Author(s)
      Guo Jiahua、Mo Jiezhang、Zhao Qian、Han Qizhi、Kanerva Mirella、Iwata Hisato、Li Qi
    • Journal Title

      Environmental Pollution

      Volume: 264 Pages: 114642~114642

    • DOI

      10.1016/j.envpol.2020.114642

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] The AHR1-ARNT1 dimerization pair is a major regulator of the response to natural ligands, but not to TCDD, in the chicken2020

    • Author(s)
      Koh Dong-Hee、Hwang Ji-Hee、Park Jae-Gon、Song Woo-Seon、Iwata Hisato、Kim Eun-Young
    • Journal Title

      Ecotoxicology and Environmental Safety

      Volume: 201 Pages: 110835~110835

    • DOI

      10.1016/j.ecoenv.2020.110835

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] In Vitro Cytotoxicity and Risk Assessments of Environmental Pollutants Using Fibroblasts of a Stranded Finless Porpoise (Neophocaena asiaeorientalis)2020

    • Author(s)
      Ochiai Mari、Kurihara Nozomi、Hirano Masashi、Nakata Akifumi、Iwata Hisato
    • Journal Title

      Environmental Science & Technology

      Volume: 54 Pages: 6832~6841

    • DOI

      10.1021/acs.est.9b07471

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Tetracycline Resistance Gene Profiles in Red Seabream (Pagrus major) Intestine and Rearing Water After Oxytetracycline Administration2020

    • Author(s)
      Obayashi Yumiko、Kadoya Aya、Kataoka Naoto、Kanda Kazuki、Bak Su-Min、Iwata Hisato、Suzuki Satoru
    • Journal Title

      Frontiers in Microbiology

      Volume: 11 Pages: 1764

    • DOI

      10.3389/fmicb.2020.01764

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Mother to Fetus Transfer of Hydroxylated Polychlorinated Biphenyl Congeners (OH-PCBs) in the Japanese Macaque (Macaca fuscata): Extrapolation of Exposure Scenarios to Humans2020

    • Author(s)
      Nomiyama Kei、Tsujisawa Yusuke、Ashida Emiko、Yachimori Syuji、Eguchi Akifumi、Iwata Hisato、Tanabe Shinsuke
    • Journal Title

      Environmental Science & Technology

      Volume: 54 Pages: 11386~11395

    • DOI

      10.1021/acs.est.0c01805

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Presentation] In vitro and in silico assessment of the activation of chicken estrogen receptor α by bisphenol analogs2021

    • Author(s)
      Mayumi Sakata, Yuka Yoshinouchi, Haruhiko Nakata, Eun-Young Kim, Hisato Iwata
    • Organizer
      Society of Toxicology (SOT) 60th Annual Meeting and ToxExpo
  • [Presentation] Effects on the cardiovascular system of ex ovo chicken embryos exposed to tris (2-chloroethyl) phosphate (TCEP)2021

    • Author(s)
      Kazuki Kanda, Shohei Ito, Dong-Hee Koh, Eun-Young Kim, Hisato Iwata
    • Organizer
      Society of Toxicology (SOT) 60th Annual Meeting and ToxExpo
  • [Presentation] Multi omics analyses revealed varying susceptibilities of rat offspring to prenatal bisphenol A exposure2021

    • Author(s)
      Hoa Thanh Nguyen, Lingyun Li, Akifumi Eguchi, Kimika Yamamoto, Tetsuro Agusa, Rajendiran Karthikraj, Kurunthachalam Kannan, Eun-Young Kim, Hisato Iwata
    • Organizer
      4th International Chemical Hazard Symposium
  • [Presentation] Effects of organohalogen compounds and temperature on the liver transcriptome and proteome of Baltic salmon2021

    • Author(s)
      Mirella Kanerva, Nguyen Minh Tue, Tatsuya Kunisue, Kristiina Vuori, Hisato Iwata
    • Organizer
      4th International Chemical Hazard Symposium
  • [Presentation] Introduction of ecotoxicology researches from Iwata’s lab and LaMer2020

    • Author(s)
      Hisato Iwata
    • Organizer
      International Symposium on Research Collaboration: Usable Science Resulting in Impact
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] ex-ovo ニワトリ胚におけるリン酸トリス(2-クロロエチル)(TCEP)の心血管毒性作用機序の解明2020

    • Author(s)
      神田宗欣, 伊藤匠平, Koh Dong-Hee, Kim Eun-Young, 岩田久人
    • Organizer
      第44 回鳥類内分泌研究会
  • [Book] 「環境ホルモンによる海洋汚染とクジラ・アザラシ・ホッキョクグマへの影響」海とヒトの関係学④ 疫病と海 秋道 智彌、角南 篤編2021

    • Author(s)
      岩田久人
    • Total Pages
      240
    • Publisher
      西日本出版社
    • ISBN
      978-4-908443-59-6
  • [Remarks] 研究室ウェブサイト日本語版

    • URL

      http://ecotoxiwata.jp

  • [Remarks] 研究室ウェブサイト英語版

    • URL

      http://ecotoxiwata.jp/en/

  • [Remarks] 研究室Facebook

    • URL

      http://fb.com/101980470429606

  • [Remarks] 岩田久人ORCID record

    • URL

      https://orcid.org/0000-0002-6867-0532

URL: 

Published: 2021-12-27  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi