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2019 Fiscal Year Annual Research Report

再生医療を革新的に効率化する機能性バイオ界面の創製

Research Project

Project/Area Number 19H02447
Research InstitutionKeio University

Principal Investigator

長瀬 健一  慶應義塾大学, 薬学部(芝共立), 准教授 (10439838)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 金澤 秀子  慶應義塾大学, 薬学部(芝共立), 教授 (10240996)
綾野 絵理  慶應義塾大学, 薬学部(芝共立), 研究員 (10424102)
Project Period (FY) 2019-04-01 – 2023-03-31
Keywords温度応答性界面 / 機能性インターフェイス / 細胞分離 / バイオセパレーション / 再生医療 / 組織工学 / バイオマテリアル
Outline of Annual Research Achievements

本研究は、再生医療に用いる細胞組織を作製するための機能性バイオインターフェイスの開発を目的としている。
令和元年度は、標的細胞を温度応答性高分子であるポリ(N-イソプロピルアクリルアミド)(PNIPAAm)に電荷を導入したバイオインターフェイスによる細胞分離の機能の開発に焦点を当てて研究を推進した。
温度応答性高分子PNIPAAmに負電荷を有するアクリル酸(Acrylic acid: AAc)と、疎水性を有するtert-ブチルアクリルアミド(tert-ブチルアクリルアミド: tBAAm)を共重合したP(NIPAAm-co-AAc-co-tBAAm)を高密度なブラシ状に修飾したガラス基板を用いた細胞分離の検討を行った。血管を構成する細胞である血管内皮細胞(HUVEC)と平滑筋細胞(SMC)を用いた分離の検討を行ったところ、37℃で、負電荷を有する温度応答性高分子ブラシにSMCの接着が促進され、20℃でHUVECの脱着が促進される傾向が見られた。この特性を利用して、温度変化だけでHUVECとSMCの分離を達成することができた。
また、同様に正電荷を有するN,N-ジメチルアクリルアミド(DMAPAAm)をPNIPAAmと共重合した温度応答性高分子ブラシを用いた間葉系幹細胞(MSC)の分離についても着手している。ガラス基板に正電荷を有するDMAPAAmを重合し、その後、NIPAAmを重合することで、PDMAPAAm-b-PNIPAAmを構築した。作製したPDMAPAAm-b-PNIPAAm修飾ガラス基板にMSCを播種したところ、37℃、20℃で他の細胞と異なる挙動を示した。これにより、温度変化のみでのMSCの精製に応用可能な事が示された。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

本研究課題では、初年度および二年目に温度応答性高分子を用いた機能性界面の構築とそれを用いた細胞分離について計画していた。温度応答性高分子に負電荷を有するアクリル酸を共重合したP(NIPAAm-co-AAc-co-tBAAm)の構築と血管構成細胞を用いた細胞分離、および、正電荷を有するDMAPAAmを温度応答性高分子に導入したPDMAPAAm-b-PNIPAAmを構築と間葉系幹細胞の分離を達成することができた。
これらの理由より当初の計画どおり順調に進捗しているといえる。

Strategy for Future Research Activity

令和二年度は、引き続き温度応答性高分子を用いた機能性バイオインターフェイスの設計を行なう。標的細胞を特異的に接着させる因子を機能性バイオインターフェイスへと導入し、細胞分離の精度を向上させる。さらに、細胞組織の作製を可能にする機能性バイオインターフェイスの開発にも着手する。

  • Research Products

    (19 results)

All 2020 2019

All Journal Article (6 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 6 results,  Open Access: 2 results) Presentation (13 results) (of which Int'l Joint Research: 6 results)

  • [Journal Article] Thermoresponsive anionic copolymer brush-grafted surfaces for cell separation2020

    • Author(s)
      Nagase Kenichi、Uchikawa Naho、Hirotani Tadashi、Akimoto Aya Mizutani、Kanazawa Hideko
    • Journal Title

      Colloids and Surfaces B: Biointerfaces

      Volume: 185 Pages: 110565~110565

    • DOI

      10.1016/j.colsurfb.2019.110565

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Mixed polymer brush as a functional ligand of silica beads for temperature-modulated hydrophobic and electrostatic interactions2020

    • Author(s)
      Nagase Kenichi、Kitazawa Sakiko、Yamada Sota、Akimoto Aya Mizutani、Kanazawa Hideko
    • Journal Title

      Analytica Chimica Acta

      Volume: 1095 Pages: 1~13

    • DOI

      10.1016/j.aca.2019.10.058

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Characteristic differences of cell sheets composed of mesenchymal stem cells with different tissue origins2019

    • Author(s)
      Nakao Mitsuyoshi、Inanaga Daimu、Nagase Kenichi、Kanazawa Hideko
    • Journal Title

      Regenerative Therapy

      Volume: 11 Pages: 34~40

    • DOI

      10.1016/j.reth.2019.01.002

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Phenotypic traits of mesenchymal stem cell sheets fabricated by temperature-responsive cell culture plate: structural characteristics of MSC sheets2019

    • Author(s)
      Nakao Mitsuyoshi、Kim Kyungsook、Nagase Kenichi、Grainger David W.、Kanazawa Hideko、Okano Teruo
    • Journal Title

      Stem Cell Research & Therapy

      Volume: 10 Pages: 353~353

    • DOI

      10.1186/s13287-019-1431-6

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Temperature-responsive mixed-mode column containing temperature-responsive polymer-modified beads and anionic polymer-modified beads2019

    • Author(s)
      Nagase Kenichi、Watanabe Maria、Zen Fumihiko、Kanazawa Hideko
    • Journal Title

      Analytica Chimica Acta

      Volume: 1079 Pages: 220~229

    • DOI

      10.1016/j.aca.2019.06.010

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Temperature-modulated cell-separation column using temperature-responsive cationic copolymer hydrogel-modified silica beads2019

    • Author(s)
      Nagase Kenichi、Inanaga Daimu、Ichikawa Daiju、Mizutani Akimoto Aya、Hattori Yutaka、Kanazawa Hideko
    • Journal Title

      Colloids and Surfaces B: Biointerfaces

      Volume: 178 Pages: 253~262

    • DOI

      10.1016/j.colsurfb.2019.02.057

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 温度応答性高分子ブラシ修飾ビーズを用いた間葉系幹細胞分離カラムの開発2019

    • Author(s)
      枝常吾郎, 長瀬健一, 金澤秀子
    • Organizer
      第 26 回クロマトグラフィーシンポジウム
  • [Presentation] 温度応答性カチオン交換型ミックスモードカラムの開発2019

    • Author(s)
      長瀬健一, 渡辺真梨亜, 善 文比古, 金澤秀子
    • Organizer
      第32回バイオメディカル分析科学シンポジウム
  • [Presentation] 温度応答性ミックスモードカラムの開発と特性評価2019

    • Author(s)
      長瀬健一, 渡辺真梨亜, 善 文比古, 金澤秀子
    • Organizer
      日本分析化学会第68年会
  • [Presentation] 正電荷を有する温度応答性高分子修飾ビーズを充填剤とした細胞分離カラムの開発2019

    • Author(s)
      稲永大夢, 市川大樹, 山田創太, 長瀬健一, 服部 豊, 金澤秀子
    • Organizer
      日本分析化学会第68年会
  • [Presentation] 選択的細胞接着性ペプチドおよび温度応答性高分子を用いた細胞分離法の開発2019

    • Author(s)
      志村昌紀, 花屋賢悟, 山田創太, 長瀬健一, 金澤秀子
    • Organizer
      日本分析化学会第68年会
  • [Presentation] Thermoresponsive Cell Separation Using Cell Adhesion Peptides2019

    • Author(s)
      Masaki Shimura, Kengo Hanaya, Sota Yamada, Kenichi Nagase, Hideko Kanazawa
    • Organizer
      RSC-Tokyo International Conference 2019
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] New cell separation method using the thermoresponsive surface modified with cell adhesion peptides2019

    • Author(s)
      Masaki Shimura, Kengo Hanaya, Yuki Hiruta, Kenichi Nagase, Hideko Kanazawa
    • Organizer
      HPLC2019 Milan
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Development of Label-free Stem Cell Separation System Using Mixed Polymer Brush Consisting of Thermo-responsive and Cationic Polymers2019

    • Author(s)
      Haruno Wakayama, Kenichi Nagase, Hideko Kanazawa
    • Organizer
      HPLC2019 Milan
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 細胞分離を目的とした温度応答性高分子の精密設計2019

    • Author(s)
      長瀬健一, 金澤秀子
    • Organizer
      第68回高分子討論会
  • [Presentation] 温度応答型アニオン性ポリマーブラシを用いた細胞分離の検討2019

    • Author(s)
      長瀬 健一, 内川 奈保, 廣谷 正, 秋元 文, 金澤 秀子
    • Organizer
      第41回日本バイオマテリアル学会大会
  • [Presentation] Cell Separation Column using Temperature Responsive Cationic Copolymer Modified Beads2019

    • Author(s)
      Kenichi Nagase, Daimu Inanaga, Goro Edatsune, Yuki Nagata, Mizutani Akimoto Aya, Kanazawa Hideko
    • Organizer
      Materials Research Meeting 2019 (MRM2019)
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] New Cell Separation System using Mixed Temperature-responsive and Cationic Polymer Brushes2019

    • Author(s)
      Haruno Wakayama, Kenichi Nagase, Hideko Kanazawa
    • Organizer
      Materials Research Meeting 2019 (MRM2019)
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Stem Cell Separation Column using Temperature-responsive Cationic Copolymer Brushes Modified Beads2019

    • Author(s)
      Goro Edatsune, Sota Yamada, Kenichi Nagase, Hideko Kanazawa
    • Organizer
      HPLC 2019 Kyoto
    • Int'l Joint Research

URL: 

Published: 2021-01-27  

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