2021 Fiscal Year Annual Research Report
Cultivation of unculitivated microorgasnisms and clarification of growth controling mechanisms by focusing on microbial interactions
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19H02873
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
青井 議輝 広島大学, 統合生命科学研究科(先), 准教授 (40386636)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
金田一 智規 広島大学, 先進理工系科学研究科(工), 准教授 (10379901)
中尾 洋一 早稲田大学, 理工学術院, 教授 (60282696)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 休眠・覚醒 / GMD培養 / 微生物間相互作用 / 増殖誘導 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、革新的な分離培養法を確立して環境中から難培養微生物を培養化すること、ほとんどの微生物が培養できない理由（未知増殖制御機構）を発見・解明することを目的としている。具体的には、１）微小テクノロジーを活用した、微生物間相互作用を高度に再現する新規分離培養手法の確立、２）未培養種の網羅的分離培養（手法の実証）、３）微生物間相互作用を介した未知増殖制御機構（休眠から覚醒を誘導するシグナル因子）の発見と解明を計画している。本年度は前年度と同様、主に、１）GMD凝集培養法を用いて多様な環境からの分離株の獲得することおよび、２）上記で得られた分離株を用いて微生物間相互作用によって増殖が顕著に増加する菌株ペアの獲得、さらに培養上清からの覚醒因子の同定を試みた。
1）超高密度植菌培養法（GMD油中凝集培養法）を用いて、下水および土壌環境などから多様な分離株を獲得した(前年度より引き続き)。
2）前年度までの検討において、ドナーとなる菌株の培養上清を添加することで平板培地上でも増殖が誘導されるペアを探索したが、今年度は特に、休眠化しやすい菌株を最初にスクリーニングし、休眠株に限定してその株の覚醒を誘導する異種を探索して、増殖を誘導し合うペアを見出した。さらに、培養上清から覚醒因子の探索を試みた。しかし、継代培養を繰り返すことで、もともと休眠する菌株が休眠しなくなるという現象が頻発するようになってしまったため、培養上清からの覚醒画分を検出するアッセイ系が成り立たなくなってしまった。おそらく変異株が出現し、実験室の培養条件（飢餓状態にならない）では変異株が優占し野生株を淘汰してしまうものと考えられた。
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| Research Progress Status |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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