2021 Fiscal Year Annual Research Report
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19H02890
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| Research Institution | Tokyo University of Pharmacy and Life Science |
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Principal Investigator |
伊藤 昭博 東京薬科大学, 生命科学部, 教授 (40391859)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
堂前 直 国立研究開発法人理化学研究所, 環境資源科学研究センター, 副部門長 (00321787)
どど 孝介 国立研究開発法人理化学研究所, 開拓研究本部, 専任研究員 (20415243)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | リジンアシル化 / TEAD / Hippo経路 / YAP / TAZ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
リジン残基上で起こる長鎖アシル化修飾の機能を明らかにすることを目的に、令和3年度は以下の3点について研究を推進した。
1. TEADの活性制御におけるリジン長鎖アシル化修飾の役割。前年度までに、TEADのリジン長鎖アシル化は転写共役因子YAP/TAZとの結合を促進することにより、YAP/TAZ依存的なTEADの転写活性に寄与することを明らかにした。今年度は、TEADのリジン長鎖アシル化の意義を調べる目的で、Hippo経路を活性化した細胞でのTEADのリジン長鎖アシル化レベルを検討したところ、Hippo経路を活性化する高密度培養はTEADのリジン長鎖アシル化を増加させた。また、高密度培養下においても、リジン長鎖アシル化はYAP/TAZとの結合を促進し、TEADの転写活性に寄与することを見出した。以上の結果から、リジン長鎖アシル化はHippo経路が活性化された細胞において、TEADの転写活性を最小限維持するのに重要な翻訳後修飾であることが示唆された。
2. TEADのリジン長鎖アシル化の制御機構。前年度までに、TEADのリジン長鎖アシル化は、システインからのアシル基の分子内転移で起こることを明らかにした。今年度は、脱長鎖アシル化機構について検討したところ、既存のリジン脱アセチル化酵素はTEADを基質としないことが分かった。加えて、チェイス実験によりリジン長鎖アシル化は極めて安定なことを明らかにした。
3. 金属ビーズを用いたリジン長鎖アシル化タンパク質の網羅的な探索法の確立。アルキン標識リジン長鎖アシル化モデルペプチドを含むトリプシン消化した細胞抽出液から金属ビーズによる精製により、リジン長鎖アシル化修飾依存的なペプチド濃縮に成功し、本法を用いてリジン長鎖アシル化タンパク質の網羅的な探索が可能であることを示した。
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| Research Progress Status |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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