2019 Fiscal Year Annual Research Report
顕微注入を伴わないin situゲノム編集技術による遺伝子改変個体の簡便な作成
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19H03152
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| Research Institution | National Defense Medical College |
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Principal Investigator |
中村 伸吾 防衛医科大学校(医学教育部医学科進学課程及び専門課程、動物実験施設、共同利用研究施設、病院並びに防衛, 防衛医学研究センター 医療工学研究部門, 講師 (00505323)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐藤 正宏 鹿児島大学, 総合科学域総合研究学系, 教授 (30287099)
大塚 正人 東海大学, 医学部, 教授 (90372945)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 経胎盤的遺伝子導入（TPGD） / ゲノム編集 / 遺伝子改変マウス / 発生工学 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ゲノム編集技術の一つであるCRISPR/Cas9システム (CRISPR系) は簡便なシステムであり、研究者にとってはゲノム改変実験が簡単に行えるというメリットがある。このCRISPR系の登場は発生工学分野においても新たな流れを作り出しており、これを用いた動物個体の遺伝子ノックアウト (KO)、ノックイン (KI) 実験が盛んに行われている。その主流は、CRISPR系の成分を受精卵へ導入する方法であり、多くの場合、ex vivo方式での受精卵操作が必要となる。即ち、①受精卵の採取、②受精卵への遺伝子導入操作 [顕微注入やelectroporation (EP) が主流]、③処置卵子の培養、④処置卵子の仮親♀卵管内への移植、等が必要となる。本研究では、この様なex vivo方式での操作を全て回避し、遺伝子改変個体（マウス）を簡便に作り出すための新技術について検討をする。具体的には、我々が先駆的に開発してきた幾つかのin vivoにおける遺伝子導入法 [例えば、胎仔への母体静脈を介した胎盤経由遺伝子導入法;transplacental gene delivery technique(TPGD)] をCRISPR系によるゲノム編集へ適用できるかどうかを検討する。そしてこれらの方法を使用して、遺伝子改変個体（マウス）を作成するための簡便、経済的、汎用性の高い方法を確立することを目指す。本年度は、主としてTPGD-GEF（TPGD for acquiring genome-edited fetuses）におけるゲノム編集効率を向上させるための方策を検討した。その結果、予想していたよりも早い時期の胎仔を対象とすることで、遺伝子導入効率が向上することを見出した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
申請書に記載した研究計画に基づいて概ね順調に研究は進展している。
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| Strategy for Future Research Activity |
予定通り令和元年度の研究を継続すると共に、主として、内在性遺伝子のゲノム編集についての検討を実施する。
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