2021 Fiscal Year Annual Research Report
Elucidating pathophysiology of pemphigus by single cell analysis of auto-reactive B cells
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19H03683
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| Research Institution | Tokyo Women's Medical University |
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Principal Investigator |
山上 淳 東京女子医科大学, 医学部, 准教授 (80327618)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高橋 勇人 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 講師 (40398615)
渡辺 貴志 国立研究開発法人理化学研究所, 生命医科学研究センター, 技師 (50406815)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 天疱瘡 / 自己反応性B細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は、天疱瘡の原因となるデスモグレイン（Dsg）に対する特異的なB細胞を患者から単離・クローニングすることにより、自己抗体の構造・自己反応性B細胞の特徴の検討を通じて天疱瘡の病態を解明し、より疾患特異的な治療法の開発につなげることである。
これまでに、蛍光抗体で標識した組み換えDsg蛋白を用いることで、天疱瘡患者の末梢血からDsg特異的B細胞を単離する方法を確立し、シングルセルRNAシーケンスの技術を用いて、その遺伝子発現解析を行ってきた。具体的には、慶應義塾大学病院に通院する天疱瘡患者の末梢血から単核球（PBMC）を分離し、フローサイトメトリーで記憶B細胞の分画からDsg特異的B細胞を単離した。また、コントロールとして非特異的B細胞も同一患者から単離した。単離したそれぞれのB細胞からcDNAを増幅し、Nextera XT DNA Library prep kit (illumina)を用いてライブラリーを作成し、Novaseq6000 (illumina)でシーケンス解析を行った。
本研究では、3例の天疱瘡患者から92のDsg特異的B細胞と115の非特異的B細胞のRNAシーケンスデータを得た。検出された10518遺伝子のうち、253が発現変動遺伝子(DEGs)であった。B細胞受容体のサブクラスではIgG1が最も多く、6種類のサブクローンが同定された。リンパ球の機能に関連するDEGに着目すると、BATFやCD9などのB細胞の分化に関連する遺伝子、S100A8/A9やCCL3といった炎症に関連する遺伝子の発現に有意差が見られた。
本研究で行われた単一細胞解析により、天疱瘡患者体内のDsg特異的B細胞の特徴に関する情報が得られた。今後、より多くの天疱瘡症例の重症度や臨床経過を反映するかを検証し、新しい検査系や治療法の開発への応用が期待される。
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| Research Progress Status |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Neonatal Linear IgA Bullous Dermatosis Mediated by Breast Milk-Borne Maternal IgA2021
Author(s)
Egami S, Suzuki C, Kurihara Y, Yamagami J, Kubo A, Funakoshi T, Nishie W, Matsumura K, Matsushima T, Kawaida M, Sakamoto M, Amagai M
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Journal Title
JAMA Dermatol.
Volume: 157
Pages: 1107-1111
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Analysis of clinical characteristics, prognosis and antibody pathogenicity of pemphigus patients positive for anti-desmoglein IgG autoantibodies in remission: a retrospective cohort study2021
Author(s)
Zhao WL, Ishii K, Egami S, Xu Z, Funakoshi T, Takahashi H, Tanikawa A, Ishiko A, Amagai M, Yamagami J
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Journal Title
J Eur Acad Dermatol Venereol.
Volume: 36
Pages: 271-278
DOI
Peer Reviewed
