胚中心B細胞とリンパ球再循環に注目した濾胞性ヘルパーT細胞リンパ腫病態の解明

2019 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19H03684
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 千葉 滋 筑波大学, 医学医療系, 教授 (60212049)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 血管免疫芽球性T細胞リンパ腫 / 濾胞性ヘルパーT細胞 / 微小環境

Outline of Annual Research Achievements

濾胞性ヘルパーT細胞リンパ腫(TFHL)は，腫瘍細胞が濾胞性ヘルパーT (TFH) 細胞の形質をもつ3種類の悪性リンパ腫の総称で，高齢者に多発し予後不良である。TFHLの大多数ではTET2遺伝子の機能喪失型変異が認められ，さらにその大多数でRHOA遺伝子の特定の変異 (G17V) が認められる。また，TFHL患者の多くでは腫瘍組織で同定されるのと同一のTET2変異をもつ，クローン性造血細胞が検出される。この観察結果から，TFHLは多くの場合TET2変異をもつ造血幹細胞に由来すると推察されている。報告者らは，造血幹細胞でTet2がノックアウトされ，T細胞でRHOA(G17V)を発現するマウスを作製し，これがTFHL (特に血管免疫芽球性T細胞リンパ腫[AITL]) のモデル動物となることを示した (Cancer Res, 2020. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-19-2787)。今年度はさらに，本AITLモデルマウスの腫瘍組織を構成する細胞をフローサイトメトリーで解析し，胚中心B (GCB) 細胞の発現パターンをもつ細胞が増加していることを明らかにした。さらに，モデルマウスの腫瘍組織から種々の細胞を分取し，細胞を組み合わせてヌードマウスに移植することにより，TFHL様腫瘍が発症する条件を検討した。その結果，TFH形質をもつ細胞を含むCD4陽性T細胞だけを移植してもヌードマウスに腫瘍は発症しない一方，CD4陽性T細胞とGCB様の発現パターンをもつ細胞とを同時に移植すると，FTHL様腫瘍が発症することが明らかになった。以上から，TFHLはTET2変異をもつ造血幹細胞に由来するGCB様細胞が，腫瘍細胞となるTFH細胞と相互作用することによって発症する可能性が強く示唆される。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

本研究は，濾胞性ヘルパーT細胞リンパ腫(TFHL)発症メカニズムの解明（特に胚中心B細胞様B細胞 [GCB-L細胞]の関与），および末梢血中の腫瘍性・非腫瘍性リンパ球のダイナミクスと病態や薬剤抵抗性との関係解明の２つを目的として設定した。このうち前者については，作製したモデルマウス（Cancer Res, 2020. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-19-2787）を用いた実験により，「クローン性造血幹細胞におけるTET2機能不全が胚中心B細胞様のB細胞(GCB-L細胞)の産生を促進」するという仮説，および，「この細胞集団がTET2機能不全とRHOA(G17V)変異の両者を有するTFH細胞と相互作用しながらTFHL発症に至る」という仮説を証明することができ，発症メカニズムの解明に貢献した。今後，患者検体を用いて組織学的にGCB-L細胞の分布や腫瘍細胞との空間的位置関係の解析を行い，論文化の予定である。一方，末梢血のリンパ球ダイナミクス解析については，３例のTFHL患者末梢血のシングルセルRNAシークエンスを行い，TFHL末梢血において特異的に認められるリンパ球集団を特定しつつあり，症例数を増やすことにより詳細な解析結果が得られると期待される。ままた，フローサイトメトリーによる解析では患者の治療前，治療中，治療後の末梢血解析結果も得られており，ダイナミクスについても情報を収集している。以上から，概ね順調に進展していると言える。

Strategy for Future Research Activity

本研究の２つの目的のうち，濾胞性ヘルパーT細胞リンパ腫(TFHL)発症メカニズムの解明（特に胚中心B細胞様B細胞 [GCB-L細胞]の関与）については，患者検体を用いたGCB-L細胞の解析を進めるとともに，マウスモデルを用いてTFH細胞由来の腫瘍細胞とGCB-L細胞との相互作用に注目し，治療標的の発見に繋がる研究を行う。一方，末梢血リンパ球ダイナミクス解析は，より多数のTFHL症例の末梢血を用いてシングルセルRNA解析，およびフローサイトメトリーを用いた治療前後での解析を進め，病態や治療抵抗性との関連研究を行う。

Research Products

• [Journal Article] Molecular pathogenesis of progression to myeloid leukemia from TET-insufficient status (2020)
  • Author(s): Shrestha R, Sakata-Yanagimoto M, Maie K, Oshima M, Ishihara M, Suehara Y, Fukumoto K, Nakajima-Takagi Y, Matsui H, Kato T, Muto H, Sakamoto T, Kusakabe M, Nannya Y, Makishima H, Ueno H, Saiki R, Ogawa S, Chiba K, Shiraishi Y, Miyano S, Enguerran Mouly, Bernard OA, Inaba T, Koseki H , Iwama A, Chiba S.
  • Journal Title: Blood Advances Volume: 4 Pages: 845～854
  • DOI: 10.1182/bloodadvances.2019001324
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Dasatinib is an effective treatment for angioimmunoblastic T-cell lymphoma (2020)
  • Author(s): Nguyen TB, Sakata-Yanagimoto M, Fujisawa M, Tanzima Nuhat S, Miyoshi H, Nannya Y, Hashimoto K, Fukumoto K, Bernard Olivier A, Kiyoki Y, Ishitsuka K, Momose H, Sukegawa S, Shinagawa A, Suyama T, SatoY, Nishikii H, Obara N, Kusakabe M, Yanagimoto S, Ogawa S, Ohshima K, Chiba S.
  • Journal Title: Cancer Research Volume: - Pages: -
  • DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-19-2787
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Mutations found in cell‐free DNAs of patients with malignant lymphoma at remission can derive from clonal hematopoiesis (2019)
  • Author(s): Suehara Y, Sakata-Yanagimoto M, Hattori K, Kusakabe M, Nanmoku T, Sato T, Noguchi M, Chiba S.
  • Journal Title: Cancer Science Volume: 110 Pages: 3375～3381
  • DOI: 10.1111/cas.14176
• [Presentation] Concurrent loss of Tet2 and Tet3 promotes leukemogenesis in mice (2019)
  • Author(s): Raksha Shrestha, Mamiko Sakata-Yanagimoto, Koichiro Maie, Motohiko Oshima, Yaeko Nakajima-Takagi, Hirotaka Matsui, Takayasu Kato, Hideharu Muto, Enguerran Mouly, Olivier A. Bernard, Haruhiko Koseki, Atsushi Iwama, Shigeru Chiba
  • Organizer: The 10th JSH INTERNATIONAL SYMPOSIUM 2019 in Ise-Shima
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Targeted sequencing and IgH rearrangement status revealed branching evolution pattern of SMZL and DLBCL (2019)
  • Author(s): Manabu Kusakabe, Mamiko Sakata-Yanagimoto, Yasuhito Suehara, Keiichiro Hattori, Toru Nanmoku, Tatsuhiro Sakamoto, Yasuhisa Yokoyama, Takayasu Kato, Naoki Kurita, Hidekazu Nishikii, Naoshi Obara, Masafumi Muratani, Yuichi Hasegawa, Shigeru Chiba
  • Organizer: The 10th JSH INTERNATIONAL SYMPOSIUM 2019 in Ise-Shima
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Allelic inactivation of Tets is responsible for leukemic transformation in mice already losing Tet functions in multiple alleles (2019)
  • Author(s): Mamiko Sakata-Yanagimoto, Shrestha Raksha, Koichiro Maie, Motohiko Oshima, Yaeko Nakajima-Takagi, Hirotaka Matsui, Takayasu Kato, Hideharu Muto, Enguerran Mouly, Olivier A. Bernard, Haruhiko Koseki, Atsushi Iwama, Shigeru Chiba
  • Organizer: The 17th Stem Cell Research Symposium
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Targeting T-cell receptor signaling pathway by dasatinib in relapsed/refractory angioimmunoblastic T-cell lymphoma (2019)
  • Author(s): Yusuke Kiyoki, Mamiko Sakata-Yanagimoto, Tran B. Nguyen, Manabu Fujisawa, Yasuhito Nanya, Shigeru Chiba, et al.
  • Organizer: The 24th Congress of EHA
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Targeting T-cell receptor signaling pathway by dasatinib in relapsed/refractory angioimmunoblastic T-cell lymphoma (2019)
  • Author(s): 清木祐介，坂田（柳元）麻実子，Tran B. Ngyen，藤澤 学，南谷泰仁，石塚幹太郎，百瀬春佳，助川慎一郎，品川 篤，周山拓也，佐藤祐二，錦井秀和，小原 直，日下部学，加藤貴康，横山泰久，栗田尚樹，長谷川雄一，小川誠司，千葉 滋
  • Organizer: 第59回 日本リンパ網内系学会総会
• [Presentation] Molecular heterogeneity in peripheral T-cell lymphoma, not otherwise specifiedrevealed by comprehensive genetic profiling (2019)
  • Author(s): 綿谷陽作，佐藤康晴，三好寛明，坂本佳奈，西田賢司，祇園由佳，坂田（柳元）麻実子，中村信彦，平本展大，白石友一，宮野 悟，真田 昌，千葉 滋，石川隆之，鶴見 寿，竹内賢吾，大島孝一，吉野 正，小川誠司，片岡圭亮
  • Organizer: 第59回 日本リンパ網内系学会総会
• [Presentation] Targeted therapy for tumor cells and microenvironmental cellsderived from clonal hematopoiesis (2019)
  • Author(s): Mamiko Sakata-Yanagimoto, Manabu Fujisawa, Shigeru Chiba
  • Organizer: 第78回 日本癌学会学術総会
  • Invited
• [Presentation] 血管免疫芽球性T細胞リンパ腫および類縁疾患のゲノム解析 (2019)
  • Author(s): 末原泰人，坂田(柳元)麻実子，服部圭一朗，日下部学，福本浩太，藤澤 学，千葉健一，白石友一，宮野 悟，小川誠司，末永孝生，千葉 滋
  • Organizer: 第78回 日本癌学会学術総会
• [Presentation] Targeting T-Cell Receptor Signaling as Angioimmunoblastic T-CellLymphoma Treatment (2019)
  • Author(s): Tran B. Nguyen, Mamiko Sakata-Yanagimoto, Manabu Fujisawa, Hiroaki Miyoshi, Yasuhito Nannya, Takuya Suyama, Yuji Sato, Hidekazu Nishikii, Naoshi Obara, Manabu Kusakabe, Seishi Ogawa, Kouichi Ohshima, Shigeru Chiba
  • Organizer: 第78回 日本癌学会学術総会
  • Invited
• [Presentation] 再発難治性血管免疫芽球性T細胞リンパ腫を対象としたT細胞受容体シグナルに対する標的治療 (2019)
  • Author(s): 坂田（柳元）麻実子，清木祐介, トラン グエン, 藤澤 学, 南谷泰仁, 石塚幹太郎, 百瀬春佳, 品川篤司, 周山拓也, 佐藤祐二, 錦井秀和, 小原 直, 日下部学, 加藤貴康, 横山泰久, 栗田尚樹, 長谷川雄一, 小川誠司, 千葉 滋
  • Organizer: 第81回 日本血液学会学術集会
• [Presentation] 血管免疫芽球性T細胞リンパ腫および類縁疾患のゲノム解析 (2019)
  • Author(s): 末原泰人，坂田（柳元）麻実子, 服部圭一朗, 日下部学, 福本浩太, 藤澤 学, 千葉健一, 白石友一, 宮野 悟, 小川誠司, 末永孝生, 千葉 滋
  • Organizer: 第81回 日本血液学会学術集会
• [Presentation] VAV1 Mutations Contributes to the Development of T-Cell Malignancies in Mice (2019)
  • Author(s): Kota Fukumoto, Mamiko Sakata-Yanagimoto, Manabu Fujisawa, Tatsuhiro Sakamoto, Tran B. Nguyen, Sakurako Suma, Hiroaki Miyoshi, Koichi Ohshima, Keisuke Kataoka, Seishi Ogawa, Shigeru Chiba
  • Organizer: 61st ASH Annual Meeting and Exposition
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Clinicopathological Analysis of “Other Iatrogenic Immunodeficiency-Associated Lymphoproliferative Disorders” Reveals a Favorable Outcome Independent of the Effectiveness of Methotrexate Discontinuation in Autoimmune Disease Patients (2019)
  • Author(s): Daisuke Kaji, Manabu Kusakabe, Mamiko Sakata-Yanagimoto, Yasuhito Suehara, Keiichiro Hattori, Yasunori Ota, Mitsuhiro Yuasa, Kosei Kageyama, Yuki Taya, Shinsuke Takagi, Hisashi Yamamoto, Yuki Asano-Mori, Naoyuki Uchida, Atsushi Wake, Shuichi Taniguchi, Go Yamamoto, Shigeru Chiba
  • Organizer: 61st ASH Annual Meeting and Exposition
  • Int'l Joint Research