2021 Fiscal Year Annual Research Report
Functional analyses of enzymatic activity- and complex formation-dependent roles of UTX in the regulation of hematopoietic stem cells and development of hematopoietic diseases
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19H03693
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| Research Institution | Tokyo Women's Medical University |
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Principal Investigator |
本田 浩章 東京女子医科大学, 医学部, 教授 (40245064)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
世良 康如 東京女子医科大学, 医学部, 助教 (40836532)
本田 善一郎 お茶の水女子大学, 保健管理センター, 特任教授 (70238814)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | エピジェネティクス / ヒストン脱メチル化 / UTX、UTY / ヒストンH3K27 / 造血幹細胞 / 造血器腫瘍 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
この申請では、定常時に正常UTX（UTXWT）を発現し、誘導可能に脱メチル化活性を欠失したUTX変異体（UTXDD）または蛋白質複合体との結合部位であるTPRドメインを欠失したUTX変異体（UTXΔTPR）を発現するマウス（UTXWT/DD、UTXWT/ΔTPR）を作製し、造血幹細胞機能や造血器腫瘍発症におけるUTXの脱メチル化活性依存性、非依存性の役割を明らかにすることを研究目的とする。また、UTXのY染色体相補体UTYの機能欠失マウスも作製し、UTX/UTYファミリーによる造血系制御の全体像の解明も試みる。
ゲノム編集を用いたノックインの手法によりUTXWT/DDとUTXWT/ΔTPRについて複数のラインが得られたと考えられた。まず、UTXWTが正常に機能しているかについて、ホモマウス作製により検討したところ（UTXWTが機能しない場合ホモマウスは胎生致死になる）、全てのラインについてホモマウスが得られ、少なくともUTXWT部分についてはUTXWTが正常に機能していることが判明した。また、UTYノックアウトについては、ゲノム編集を用いて得られた複数のラインについて、抗UTY抗体を用いて造血細胞におけるUTY遺伝子産物の欠失を確認した。
まずUTXWT/DDマウス、UTXWT/ΔTPRマウスについてUTXWT欠失を行い、UTXDD、UTXΔTPRの発現誘導を行った。造血細胞を用いたWBの結果、UTXWTは発現しているがUTXDD、UTXΔTPRの発現は認められなかった。この結果は、欠失誘導効率が悪いか、またはUTXDD、UTXΔTPRを発現する造血細胞は生存出来ないことを示している。前者の可能性については別の誘導系を検討すると共に、後者の可能性についてはまず誘導前の造血細胞をin vitroで培養し、その後に欠失誘導を行いUTXDD、UTXΔTPRの発現を解析する予定である。
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| Research Progress Status |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Presentation] ヒストン修飾因子UTXは老化関連遺伝子を制御することにより造血系維持に関与する2021
Author(s)
世良康如, 中田雄一郎, 上田健, 山崎憲政, 小出周平, 小林央, 池田健一郎, 小畠浩平, 岩崎正幸, 小田秀明, 金井昭教, 長町安希子, 稲葉俊哉, 外丸祐介, 一戸辰夫, 小泉美穂, 宮川佳彦, 本田善一郎, 岩間厚志, 須田年生, 田久保圭誉, 本田浩章
Organizer
第44回日本分子生物学会年会
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