2021 Fiscal Year Annual Research Report
機能増強させた細胞由来のエクソソームを用いたcell-free血管再生療法の開発
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19H03739
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
濱野 公一 山口大学, 大学院医学系研究科, 教授 (60263787)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
上野 耕司 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (30736070)
佐村 誠 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (30773402) [Withdrawn]
森景 則保 山口大学, 医学部附属病院, 講師 (50335741)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | エクソソーム / 血管新生 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
今年度は、前年度のin vitro解析の研究結果から血管新生能があると予測される4つのmicroRNAをin vivoのマウス下肢虚血モデルで解析した。
4つのmicroRNAおよびコントロールとなるmicroRNA mimicを合成し、その合成したコントロールと4つのmicroRNA mimicそれぞれを細胞に導入することで、コントロールおよび4つのmicroRNAを内包したエクソソームが培養液中に細胞から分泌された。そして、その培養液を濃縮後、エクソソーム単離カラムを使用して、エクソソームを豊富に含む分画を単離した。そして、その単離したエクソソームの濃度をELISAで測定した。そのエクソソームを、左大腿動脈結紮したマウス下肢虚血モデルに移植し、経時的にマウス下肢の血流をドップラーで測定し、in vivoで血管新生能があるmicroRNAを同定することが出来た。
そして、血流改善を裏付ける機序を解明するために、上記と同様の方法で作製したエクソソームを再度、マウス下肢虚血モデルに移植し、移植して2日後に大腿部の組織を採取して、RNAを抽出後、cDNAを作製し、qPCR解析を実施して、血管新生に関与する遺伝子の発現を解析した。解析結果から、in vivoで血管新生能を示したmicroRNAを内包したエクソソームを投与した場合、血管新生に関与する複数の遺伝子の発現が上昇することが確認された。
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| Research Progress Status |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Autologous transplantation of multilayered fibroblast sheets prevents postoperative pancreatic fistula by regulating fibrosis and angiogenesis2021
Author(s)
Keisuke Iwamoto, Toshiro Saito, Yoshihiro Takemoto, Koji Ueno, Masashi Yanagihara, Tomoko Furuya-Kondo, Hiroshi Kurazumi, Yuya Tanaka, Yohei Taura, Eijiro Harada, Kimikazu Hamano
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Journal Title
American Journal of Translational Research
Volume: 13
Pages: 1257～1268
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] A pilot study using cell-mixed sheets of autologous fibroblast cells and peripheral blood mononuclear cells to treat refractory cutaneous ulcers2021
Author(s)
Takahiro Mizoguchi, Kotaro Suehiro, Koji Ueno, Soichi Ike, Takashi Nagase, Makoto Samura, Takasuke Harada, Hiroshi Kurazumi, Ryo Suzuki, Koji Harada, Taro Takami, Noriyasu Morikage, Kimikazu Hamano
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Journal Title
American Journal of Translational Research
Volume: 13
Pages: 9495～9504
Peer Reviewed / Open Access
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