2021 Fiscal Year Annual Research Report
Cell lineage determination of embryonic salivary gland
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19H03827
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| Research Institution | Showa University |
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Principal Investigator |
美島 健二 昭和大学, 歯学部, 教授 (50275343)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
安原 理佳 昭和大学, 歯学部, 講師 (20453649)
大庭 伸介 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(歯学系), 教授 (20466733)
田中 準一 昭和大学, 歯学部, 講師 (40710166)
辻 孝 国立研究開発法人理化学研究所, 生命機能科学研究センター, チームリーダー (50339131)
渡辺 貴志 国立研究開発法人理化学研究所, 生命医科学研究センター, 技師 (50406815)
馬渕 洋 順天堂大学, 大学院医学研究科, 特任准教授 (50424172)
上野 博夫 国立研究開発法人国立循環器病研究センター, 研究所, 客員研究員 (60332368) [Withdrawn]
行森 茜 昭和大学, 歯学部, 助教 (60813748)
阪井 丘芳 大阪大学, 歯学研究科, 教授 (90379082)
鯨岡 聡子 昭和大学, 歯学部, 助教 (90824673)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 唾液腺幹細胞 / 細胞系譜解析 / レインボーマウス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的はマウス胎生期唾液腺に幹細胞ヒエラルキーが認められるか否かを検証することにある。昨年度までのマルチカラー細胞追跡マウスを用いた幹細胞ヒエラルキーの解析結果として、胎生16日の胎仔マウスの唾液腺においては、殆どの唾液腺細胞がすでに個別の細胞系譜へ分化誘導されていることが明らかとなった。そこで本年度は、さらに早期の発生段階のマウス唾液腺における細胞系譜解析を実施した。すなわち、Rosa26-CreERT2マウスとRosa26-rainbowマウスを交配し、プラグチェック後、胎生13.5日に11.5microg/gのタモキシフェンを妊娠マウスの腹腔内に投与した。その結果、妊娠早期におけるタモキシフェン投与の毒性に起因すると考えられるが、正常な出産は認められず胎仔死亡が確認された。この胎仔死亡は、複数回確認されたので、遺伝子改変マウスを用いたin vivo modelによる細胞系譜の追跡から、胎仔マウス唾液腺の器官培養法を応用した細胞系譜の追跡方法に変更した。すなわち、Rosa26-CreERT2マウスとRosa26-rainbowマウスを交配し後、胎生13日に胎仔マウスの顎下腺を採取し器官培養する。培養液中にタモキシフェン添加し24時間培養後、培地を交換し、さらに6日間培養を継続した。その後、凍結切片を作製し蛍光を観察することにより細胞系譜を追跡した。結果としては、4色の蛍光を有する細胞集団が検出され、2系統の細胞系譜に分化する連続した同色の細胞集団を検出することができた。一方、3系統への分化を示す同色の細胞集団は検出できなかった。このことより、3系統への多分化能を有する唾液腺幹細胞は胎生13日より前の発生初期段階に存在する可能性が示唆された。
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| Research Progress Status |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(7 results)
