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2019 Fiscal Year Annual Research Report

In vitro derivation of germ cells from common marmoset pluripotent stem cells

Research Project

Project/Area Number 19J12871
Research InstitutionKeio University

Principal Investigator

吉松 祥  慶應義塾大学, 医学研究科, 特別研究員(DC2)

Project Period (FY) 2019-04-25 – 2020-03-31
Keywordsマーモセット / 生殖細胞 / ES細胞 / iPS細胞 / 遺伝子改変
Outline of Annual Research Achievements

本年度は、これまでの研究成果に関しての論文投稿及び、実験系の確立を行なった。まず、マーモセットES細胞における高効率遺伝子改変による生殖細胞特異的レポーターの導入に関しての論文発表を行なった(Yoshimatsu and Sone et al., PLOS One 2019; Yoshimatsu et al., Stem Cell Res 2020)ほか、マーモセットからのTransgene非依存性iPS細胞の作出に関しても論文投稿を行なった(Nakajima and Yoshimatsu et al., BBRC 2019; Yoshimatsu et al., submitted)。

以上のように作製した生殖細胞特異的レポーター導入ES/iPS細胞を用いて、始原生殖細胞(PGC)において特異的に発現する転写因子を薬剤誘導性に強制発現させることによって、分化10日目にFACSによってレポーター及びマーカー陽性細胞を分取することに成功した。これらの細胞はヒトやマウスで報告されているPGC特異的な遺伝子発現パターンを示すことから、本課題における第1の目標(PGC誘導系の構築)は達成された(Yoshimatsu et al., submitted)。

今後は、分化誘導した細胞のMethylome解析を行うほか、本研究で得られたマーモセットPGC様細胞のTranscriptomeデータから他種(ヒト、マカクザル、マウス)PGCとの種差に関しての考察を行う予定である。さらに、最終的な機能的配偶子の誘導に向けた条件検討を引き続き進めていく。具体的には、PGC様細胞からの精子幹細胞(SSC)の誘導、および卵巣構造の再構築に向けた実験系の確立を目指す。

Research Progress Status

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (9 results)

All 2020 2019 Other

All Journal Article (5 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 5 results,  Open Access: 2 results) Presentation (2 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results) Remarks (1 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Journal Article] Generation of a male common marmoset embryonic stem cell line DSY127-BV8VT1 carrying double reporters specific for the germ cell linage using the CRISPR-Cas9 and PiggyBac transposase systems2020

    • Author(s)
      Yoshimatsu Sho、Sato Tsukika、Yamamoto Masafumi、Sasaki Erika、Nakajima Mayutaka、Nakamura Mari、Shiozawa Seiji、Noce Toshiaki、Okano Hideyuki
    • Journal Title

      Stem Cell Research

      Volume: in press Pages: 101740~101740

    • DOI

      10.1016/j.scr.2020.101740

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Establishment of induced pluripotent stem cells from common marmoset fibroblasts by RNA-based reprogramming2019

    • Author(s)
      Nakajima Mayutaka、Yoshimatsu Sho、Sato Tsukika、Nakamura Mari、Okahara Junko、Sasaki Erika、Shiozawa Seiji、Okano Hideyuki
    • Journal Title

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      Volume: 515 Pages: 593~599

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2019.05.175

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A versatile toolbox for knock-in gene targeting based on the Multisite Gateway technology2019

    • Author(s)
      Yoshimatsu Sho、Sone Takefumi、Nakajima Mayutaka、Sato Tsukika、Okochi Ryotaro、Ishikawa Mitsuru、Nakamura Mari、Sasaki Erika、Shiozawa Seiji、Okano Hideyuki
    • Journal Title

      PLOS ONE

      Volume: 14 Pages: e0221164

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0221164

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Pathological Progression Induced by the Frontotemporal Dementia-Associated R406W Tau Mutation in Patient-Derived iPSCs2019

    • Author(s)
      Nakamura Mari、Shiozawa Seiji、Tsuboi Daisuke、Amano Mutsuki、Watanabe Hirotaka、Maeda Sumihiro、Kimura Taeko、Yoshimatsu Sho、Kisa Fumihiko、Karch Celeste M.、Miyasaka Tomohiro、Takashima Akihiko、Sahara Naruhiko、Hisanaga Shin-ichi、Ikeuchi Takeshi、Kaibuchi Kozo、Okano Hideyuki
    • Journal Title

      Stem Cell Reports

      Volume: 13 Pages: 684~699

    • DOI

      10.1016/j.stemcr.2019.08.011

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Evaluating the efficacy of small molecules for neural differentiation of common marmoset ESCs and iPSCs2019

    • Author(s)
      Yoshimatsu Sho、Nakamura Mari、Nakajima Mayutaka、Nemoto Akisa、Sato Tsukika、Sasaki Erika、Shiozawa Seiji、Okano Hideyuki
    • Journal Title

      Neuroscience Research

      Volume: in press Pages: in press

    • DOI

      10.1016/j.neures.2019.09.005

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Deriving transgene-free iPSCs from fibroblasts of multiple mammalian species via a neural stem cell-like state2019

    • Author(s)
      Yoshimatsu Sho、Okano Hideyuki
    • Organizer
      第42回日本分子生物学会年会
  • [Presentation] IN VITRO DISEASE MODELING OF THE FTDP-17 TAU R406W MUTATION USING PATIENT-DERIVED IPSCS2019

    • Author(s)
      Nakamura Mari、Shiozawa Seiji、Tsuboi Daisuke、Amano Mutsuki、Watanabe Hirotaka、Maeda Sumihiro、Kimura Taeko、Yoshimatsu Sho、Kisa Fumihiko、Karch Celeste M.、Miyasaka Tomohiro、Takashima Akihiko、Sahara Naruhiko、Hisanaga Shin-ichi、Ikeuchi Takeshi、Kaibuchi Kozo、Okano Hideyuki
    • Organizer
      International Society for Stem Cell Research 2019
    • Int'l Joint Research
  • [Remarks] researchmap

    • URL

      https://researchmap.jp/yoshima

  • [Patent(Industrial Property Rights)] 誘導多能性幹細胞の製造方法及びキット2019

    • Inventor(s)
      塩澤誠司、岡野栄之、吉松祥
    • Industrial Property Rights Holder
      塩澤誠司、岡野栄之、吉松祥
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      2019-78907

URL: 

Published: 2021-01-27  

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