2021 Fiscal Year Final Research Report
Extracellular production of scFv using recombinant E. coli based on DO-stat fed-batch culture
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19K05162
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 27040:Biofunction and bioprocess engineering-related
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| Research Institution | Kyoto Institute of Technology |
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Principal Investigator |
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 大腸菌 / 単鎖抗体 / 流加培養 / 分泌生産 |
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| Outline of Final Research Achievements |
In the present work, a DO-stat fed-batch culture system was developed and applied to the recombinant scFv production using recombinant E. coli. Successful soluble anti-CRP scFv production in a high cell density cultivation of recombinant E. coli was achieved under DO conditions between 5 and 40% of saturation. Furthermore, it was found that the use of yeast extract-enriched feeding medium was effective to prevent scFv from proteolytic degradation.
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| Free Research Field |
生物化学工学
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| Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
本研究で用いられた単鎖抗体をはじめとする各種抗体断片は、今後の医療診断、免疫検査に必須の試薬で、その生産効率化の実現は大きな社会的意義がある。またタンパク質医薬品製造における分解抑制問題は切実なニーズであり、本課題を解決することにより生産コストを大幅に下げることに繋がる。このように本研究は、免疫診断用抗体フラグメントを始めとする組換えタンパク質生産を革新的に低コスト化・効率化する手法であり、ウィルス感染症の検査用キットの低コスト化に大きく貢献するとともに、機能性ペプチドなど比較的低分子量で、糖鎖修飾が不要なタンパク生産に幅広く応用できる。
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