2023 Fiscal Year Research-status Report
新規調節因子の同定によるイネ種子の休眠・発芽調節機構の解析
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19K05830
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Research Institution | Kyoto Prefectural University |
Principal Investigator |
森田 重人 京都府立大学, 生命環境科学研究科, 准教授 (20295637)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
北島 佐紀人 京都工芸繊維大学, 応用生物学系, 准教授 (70283653)
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Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2025-03-31
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Keywords | 種子 / 発芽 / 休眠 / レドックス調節 / イネ |
Outline of Annual Research Achievements |
本研究ではイネ種子の休眠・発芽の調節機構の解明を目的として、令和5年度には以下の実験を行った。 OsGRXC2;2の標的タンパク質の探索:イネ種子において発芽抑制に働いているタンパク質であるOsGRXC2;2について標的タンパク質を同定するため、共免疫沈降による相互作用タンパク質の同定を試みた。昨年度作製した抗OsGRXC2;2抗体を用いてイネ種子タンパク質の免疫沈降を行った。OsGRXC2;2過剰発現イネの完熟種子から調製した可溶性タンパク質に対して免疫沈降を行った結果、SDS-PAGEで複数のバンドが検出された。また2次元電気泳動でも複数のタンパク質スポットが観察された。これらのスポットを切り出してトリプシンで消化後、得られたペプチド断片の質量分析を行ったが、MASCOTサーチにおいて有意な結果が得られず、タンパク質を同定することができなかった。沈降画分に得られたタンパク質の量が少な過ぎたことが原因と思われたため、複数の泳動ゲルのスポットを集めて再度試みたが、残念ながらタンパク質同定には至らなかった。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
OsGRXC2;2標的タンパク質の探索については、共免疫沈降を行ったがタンパク質の同定に至らなかった。
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Strategy for Future Research Activity |
本研究は当初令和4年度が最終年度であったが、進捗状況が遅れていることから1年間の期間延長を行った。しかしながらOsGRXC2;2標的タンパク質の探索を行ったが、所期の結果を得ることができなかった。サンプル量をさらに増やして実験を再度行うことは物理的に難しいため、さらなる実験は断念せざるを得ない状況である。なお当初計画通りではないものの、これまでにOsGRXC2;2がイネ種子の発芽・休眠調節に関与することを示唆する知見を得たため、コロナ特例によりさらにもう1年期間延長し、得られた成果を取りまとめ論文発表する。
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Causes of Carryover |
理由) 期間延長した令和5年度に研究成果をとりまとめる予定であったが、実験が遅れた結果、論文投稿に間に合わなかった。 使用計画) もう1年期間延長し、これまでに蓄積している成果を学会発表、論文発表するため、これに必要となる旅費、英文校閲、掲載料に支出する。
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