2020 Fiscal Year Research-status Report

圃場と流通における各種ブドウウイルス感染の疫学的考察と対策体制の設立

Research Project

Project/Area Number	19K06049
Research Institution	Shinshu University
Principal Investigator	荷田瑞穂信州大学, 経法学部, 特任准教授 (40831954)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	鹿取みゆき信州大学, 経法学部, 特任教授 (70774321)
Project Period (FY)	2019-04-01 – 2022-03-31
Keywords	ぶどう / ぶどうウイルス / リーフロール / レッドブロッチ
Outline of Annual Research Achievements	ぶどうウイルスサンプルキットの配布：2020年度に60個のキットを配布。計49サンプルを採集。内訳：山形10サンプル、北海道18サンプル、、島根4サンプル、秋田2サンプル、長野3サンプル、大分4サンプル、山梨12サンプル。2021年度には80個のサンプルキットを配布予定。新しいぶどうリーフロール２，３，レッドブロッチ用の定量PCRプロトコル：2020年に既存のPCR、そして定量PCRのプロトコルを改良。自身のラボにて安定した結果が得られることを確認。更にサンプルキットを用いた検定も直接木から採ったサンプルのDNA抽出をしたサンプルと比べることにより、無事に行えることを確認。2020年以降のサンプルについて定量PCRを用いる準備を整えた。ウイルスサンプルキットを用いた検定：前年度までに集めた35サンプルをPCRを用いて検定、一つのサンプルに付き、2つのサブサンプルを用いて確認した。リーフロールウイルス２（12％）、リーフロールウイルス３（18％）、レッドブロッチウイルス（0％）の罹患が認められた。無事に検定が行われたことに寄り、ウイルスサンプルキットの確認も終了した。新規のサンプルについては、2021年6月を目処に前述の定量PCRを用いて罹患率を探る予定である。その他の活動：2020年1月21日にに信州大学にて「日本におけるブドウ苗木品質管理と向上の重要性」という題目でセミナーを行い、ぶどうウイルスの重要性について話し合う。全国からブドウ農家、苗木業者、自治体の農業課職員など、約150名が参加。2020年3月26日に上記と同じ題材で関係者用のビデオを制作、2020年9月8日にはぶどうウイルスワークショップをオンラインセミナーを行う。ブドウ農家を中心に約50名が参加。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 新型コロナの影響により、実際に圃場に出てサンプルを取ることがほぼ不可能になったが、農家の方々が利用できるサンプルキットの開発により、キットを郵送することで対応できた。2020年度のサンプルについては、物流が滞っていることにより、検定が少々遅れているが、今月（5月）になり目処が立ったことで、夏までには検定をすることが可能になった。当初予定していた苗木業者からのサンプルが若干不足しているが、業者の方々からは協力を得られており、また、業者に木を卸している農家の方々からサンプルを採取しているので、予定していたものと同様の結果が得られるのではと考えている。
Strategy for Future Research Activity	2021年度は更に多くのサンプルキットを配布予定である。ウイルスの検定も速やかに行う予定。ある程度のサンプルが集まり、当初の大きな目的であったサンプルキットの確認、定量PCRプロトコルの確立が予定通りに進んだので、当初の計画には希望的目標として書かれていた、一部のターゲットを使ったゲノム解析をある程度勧めることも可能ではないかと考えている。
Causes of Carryover	当初の予定では定量PCRの機材、サンプルキット、ウイルス検定に用いる材料や薬剤を購入するはずであったが、研究責任者が米国で働いていること、更に新型コロナの影響により物流が大幅に滞り、購入を見合わせた。当初の研究目標は他の資金を落ちいて達成しつつあるので、希望的目標に上げていたゲノム解析に必要な機材と材料を2021年度に購入予定である。
Remarks	日本のブドウ農家対象のウェブサイト、ウイルス関係のプレゼンテーション、サンプルキットの使用方法のビデオなどを掲載。