2019 Fiscal Year Research-status Report
カレニア・ミキモトイ殺藻ウイルスと宿主の間にある共存と対立の動的平衡の検証
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19K06219
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| Research Institution | Fisheries Research and Education Agency |
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Principal Investigator |
中山 奈津子 国立研究開発法人水産研究・教育機構, 瀬戸内海区水産研究所, 主任研究員 (20612675)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
浜口 昌巳 国立研究開発法人水産研究・教育機構, 瀬戸内海区水産研究所, グループ長 (60371960)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | カレニア / KmV / 感染プロセス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
有害藻類カレニア・ミキモトイ(Karenia mikimotoi)による赤潮は，規模や分布域を拡大し，日本の水産業に深刻な被害を与えている。申請者は，最近，カレニアを特異的に殺滅するウイルス(KmV)を，赤潮衰退期の海水から分離・培養することに成功した。これは，カレニア赤潮の衰退にウイルスが関わっている可能性を示すものである。ウイルスは，標的生物のみを殺滅し，爆発的に増えるので，大増殖する赤潮生物を連鎖的に死滅させることが可能であり，赤潮防除技術への利用が大いに期待できる。これまでの研究より，KmVは少なくとも2種類の感染型に分けられ，それらは，宿主への感染時間が異なルことが明らかになった。さらに，KmVが赤潮の衰退期から分離されたことより，カレニア赤潮の衰退，すなわち，赤潮形成期間に影響を与えている可能性が見出された。しかしながら，ウイルスの関わるカレニアの死が，感染死によるものか，ウイルス感染による個体群全体の死を回避・軽減するための自身の細胞死によるものか，ウイルス感染とカレニアの死との関係は明らかになっていない。本課題では，高感度定量PCRの構築や，発現解析やアポトーシス解析等によるウイルス感染時のカレニアの応答を明らかにすること，これらの結果をもとに，環境動態と相互作用等生理生態学的な知見を統合し，赤潮衰退期におけるウイルスの影響を明らかにすることを目的としている。今年度は，新規ウイルスの同定やウイルス粒子回収法の検討，相互作用に関する試験系の構築等を行なった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
2019年度は，新規KmVの精製や性質，殺藻力を測定し，分子解析に向けた回収法を検討した。本ウイルスの核酸回収は，分解酵素などの夾雑物が回収の阻害をするため，極めて困難であった。引き続き，検討を重ねる予定である。定量PCRの構築が止まっていることから，遺伝子によらない方法である，ウイルス感染時にカレニア生体内で起こるであろう核の形態変化をモニタリングする技術の開発に着手し，画像解析技術の確立に向けて実験を実施している。 また，相互作用の研究に関しては，予備実験を繰り返して系を構築した。いくつかの検討試験を実施することによって，測定系が完成する。さらに，現場で起こりうる事象の一つに，UV照射がウイルス感染に及ぼす影響について知見を深める必要があった。これは，ウイルスの中には，UV照射や抗生物質処理により細胞崩壊が誘発されるものがあるため，昼間プランクトンが表層に集積し，UV照射によってウイルス感染が誘発され，赤潮の終息に関与すると考えたからである。今年度は，様々な波長を照射してカレニア減衰とKmVの増殖を観察したところ，UV領域の光照射によってウイルス感染が促進されることが推察されるに至った。
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| Strategy for Future Research Activity |
核酸の回収がほぼ可能になり，定量PCRの構築が再開できる段階に至った。また，相互作用に関する解析法が構築されたことにより，今年度は感染に関わるタンパク質の特定を進める予定である。UV照射がウイルス感染に与える影響についても，引き続き知見を収集する予定である。
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| Causes of Carryover |
試験に使用予定のベクター等試薬が、コロナウイルスの影響で３月中に納品困難となり、次年度に購入することとした。
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Research Products
(1 results)
