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2020 Fiscal Year Research-status Report

Analysis of genetic characters relating to transmissibility and pathogenesis in bovine leukemia virus wild-type strains

Research Project

Project/Area Number 19K06410
Research InstitutionAzabu University

Principal Investigator

村上 裕信  麻布大学, 獣医学部, 講師 (60620929)

Project Period (FY) 2019-04-01 – 2022-03-31
Keywords牛伝染性リンパ腫(牛白血病) / BLV / 伝播性 / 病原性 / 強毒株 / 弱毒株 / 変異
Outline of Annual Research Achievements

牛伝染性リンパ腫(旧名:牛白血病)ウイルス(BLV)の病原性および伝播性に関連する変異を明らかにするため、118頭の国内で飼養されている牛から感染性分子クローンを作出し、そのウイルス産生量をリアルタイムPCRにより、病原性を3次元(3D)培養により評価した。その結果、前年に高伝播性株と推測された175番目の塩基がTからCに変異している株(175C株)では有意にウイルス産生量が高く、その変異を他の株に導入するとウイルス産生量が有意に上昇することを明らかにした。このウイルス性状が野外の感染リスクに寄与しているか調べるため、1農場から経時的に採取したDNAサンプルを利用して、過去から現在の175C株の推移を調べた結果、過去の検体(2013-2014年)より最近採取した検体(2018-2019年)で有意に175C株が増加していることが明らかになった。更に、この農場では感染率も上昇していた。そのため、175番目の塩基の変異は伝播性に大きく影響をもたらすことが示唆された。一方、病原性に関連する変異は、キメラウイルスおよび病原性関連遺伝子発現量の解析から、少なくとも41箇所の変異が関連していることが明らかになった。この変異のうち26箇所はgag-pro-polであることから、gag-pro-pol領域の変異が病原性に大きく関与していることが示唆された。しかし、3D培養で形質転換を引き起こす高病原性株で共通の変異は認められないため、病原性に関与する変異は複数存在し、複数のゲノム配列パターンが高病原性に寄与することが示唆された。また、上記の解析結果は、伝播性と病原性に関与する変異が異なることを示しており、過去の研究から推測された伝播性と病原性は独立して変化することを証明する結果になった。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

伝播性に関連する変異は現在1箇所の変異のみ同定したが、リバースジェネティクス方による検証だけでなく、農場における伝播性評価から、伝播リスクに最も重要な変異である可能性を示した。また、病原性に関連する変異は、特定の1塩基変異に起因せず、特定の遺伝子配列パターンにより病原性を発揮することを明らかにした。

Strategy for Future Research Activity

伝播性に関連する変異は現在1箇所の変異だけが同定されたが、他の株への変異および野外の伝播性評価から、伝播リスクに最も重要な変異である可能性が示唆されている。一方で、一部の175C株で、ウイルス産生量が低い株が見いだされたため、ウイルス産生を抑制する変異の存在が示唆されている。そのため、175番目の塩基以外に伝播性に寄与する変異について、上記の株を用いて解析を進める。病原性については、細胞の遺伝子発現パターン解析により、現在推定している変異の中で特に重要な変異を、リバースジェネティクス法を用いて検証する。

  • Research Products

    (5 results)

All 2021 2020

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results)

  • [Journal Article] Purification of membrane vesicles from Gram-positive bacteria using flow cytometry, after iodixanol density-gradient ultracentrifugation2021

    • Author(s)
      Nasukawa Tadahiro、Sugimoto Ryosuke、Uchiyama Jumpei、Takemura-Uchiyama Iyo、Murakami Hironobu、Fukuda Ken、Matsuzaki Shigenobu、Sakaguchi Masahiro
    • Journal Title

      Research in Microbiology

      Volume: 172 Pages: 103792~103792

    • DOI

      10.1016/j.resmic.2020.11.003

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Analyses of propagation processes of Staphylococcus aureus bacteriophages S13′ and S25-3 in two different taxonomies by definitive screening design2021

    • Author(s)
      Takeuchi Ippei、Nasukawa Tadahiro、Sugimoto Ryosuke、Takemura-Uchiyama Iyo、Murakami Hironobu、Uchiyama Jumpei
    • Journal Title

      Virus Research

      Volume: 298 Pages: 198406~198406

    • DOI

      10.1016/j.virusres.2021.198406

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] SQAP, an acyl sulfoquinovosyl derivative, suppresses expression of histone deacetylase and induces cell death of cancer cells under hypoxic conditions2021

    • Author(s)
      Kawakubo Hirofumi、Kamisuki Shinji、Suzuki Kei、Izaguirre-Carbonell Jesus、Saito Shiki、Murata Hiroshi、Tanabe Atsushi、Hongo Ayumi、Murakami Hironobu、Matsunaga Sachihiro、Sakaguchi Kengo、Sahara Hiroeki、Sugawara Fumio、Kuramochi Kouji
    • Journal Title

      Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry

      Volume: 85 Pages: 85~91

    • DOI

      10.1093/bbb/zbaa015

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Diagnosis of a sublaryngeal abscess in a Japanese Black calf using computed tomography2020

    • Author(s)
      SATO Reiichiro、MERCIER Christoph Koch、AIHARA Naoyuki、KAWAI Kazuhiro、MURAKAMI Hironobu、YASUDA Rie、SATOH Hiroyuki、YOKOYAMA Taiki、YAMADA Kazutaka
    • Journal Title

      Journal of Veterinary Medical Science

      Volume: 82 Pages: 1497~1501

    • DOI

      10.1292/jvms.20-0384

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Development of multipurpose recombinant reporter bovine leukemia virus2020

    • Author(s)
      Murakami Hironobu、Yajima Yusuke、Sato Fumiaki、Kamisuki Shinji、Taharaguchi Satoshi、Onda Ken、Roh Sanggun、Uchiyama Jumpei、Sakaguchi Masahiro、Tsukamoto Kenji
    • Journal Title

      Virology

      Volume: 548 Pages: 226~235

    • DOI

      10.1016/j.virol.2020.07.011

    • Peer Reviewed

URL: 

Published: 2021-12-27  

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