2020 Fiscal Year Research-status Report
Visual experience-dependent genetic and functional changes in mouse auditory cortex
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19K06947
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| Research Institution | Soka University |
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Principal Investigator |
川井 秀樹 創価大学, 理工学部, 教授 (90546243)
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2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | クロスモード可塑性 / 聴覚皮質 / 視覚喪失 / 遺伝子発現 / 内在的膜特性 / 神経細胞興奮性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
研究の目的の一つである「暗所飼育での視覚喪失による聴覚皮質第４層ニューロンの電気生理学的特徴、形態的特徴、および遺伝子発現の変化」について実験を行った。電気生理学的記録法を用いて、第４層ニューロンの内在的特性と活動電位の発火特性について検証を行ったところ、盲目による影響は観察されなかった。これは、先行研究で第４層での応答増強が報告されていることから、その機序としてニューロンの内在的特性や興奮性の変化が関与していないことを示唆する。しかし、以前の当研究室の実験データとは異なる結果が出たため、更なる実験が必要になる。また、ニューロンの形態への影響を調べる実験に着手し、染色法の確立を終え、解析方法の確立に取り組んだ。一方、単一ニューロンにおける遺伝子発現変化をsingle cell RNA-seqで解析するための準備実験を行った。単一ニューロンでのRNA採取及びcDNAライブラリーの作成を行い、純度の同定を行ったが、純度が低いことから、cDNAライブラリー作成の手法の変更などを行った。またRNA採取自体が難しくなり、トラブルシューティングが必要になった。原因の一つとして、マニピュレーターの故障が考えられ、新たなマニピュレーターを購入した。これらの状況に加え、コロナ禍であることなどから、継続した実験が難しくなり、対応をせざるを得ない状態になったため、いずれの実験も途中段階にある。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
進捗状況が遅れている理由は、装置の故障や、実験手法の確立のためのトラブルシューティングに加え、コロナ禍による実験時間の減少が考えられる。
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| Strategy for Future Research Activity |
電気生理学的実験及び単一ニューロンでの遺伝子発現変化の研究においてには、集中的な実験時間と、技術的スキルの獲得が必要と考えるため、来年度への延長を視野に、今年度は、ニューロンの形態の解析方法の確立と、トランスクリプトーム解析方法の確立に取り組む。
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| Causes of Carryover |
今年度は、コロナ禍による実験の進行の遅れと、実験のトラブルシューティングに時間がかかり、使用しなかった経費が生じたため。次年度はトラブルシューティングの継続と解析手法の確立に必要であれば使用する計画である。
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