2022 Fiscal Year Annual Research Report
新規非分解系エンドサイトーシス経路の生理的機能と病態との関連
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19K07248
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| Research Institution | Kagawa University |
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Principal Investigator |
川合 克久 香川大学, 医学部, 助教 (80534510)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
荒木 伸一 香川大学, 医学部, 教授 (10202748)
江上 洋平 香川大学, 医学部, 講師 (80432780)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | マクロピノサイトーシス / RabGTPase / 小胞輸送 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の解析対象であるマクロパイノサイトーシス様の新規輸送経路は次の特徴を示す。（１）取り込みの初期の段階でマクロパイノソーム様の構造から長い管状構造を形成する。（２）マクロパイノソーム様の構造のカップが閉じずに消滅する。これまでに我々は、マクロパイノソーム様構造(カップ構造)および出芽した管状構造にRab10が一過的に強く局在することを見出している。
Rab10陽性新規輸送経路によって輸送される分子の同定を目的に、受容体および接着分子などの各種膜タンパク質のGFP融合変異体発現プラスミドを作製し、Rab10陽性のカップ構造およびチューブ構造に局在するかどうかを検討した。その結果、免疫チェックポイントに関わるPD-L1がRab10陽性輸送経路によって核近傍に輸送されていることを見出した。さらに、インターフェロンgamma刺激を行ったRAW264細胞において、内在性PD-L1がRab10陽性輸送経路に存在することを確認した。よって、PD-L1はRab10陽性新規輸送経路で優先的に輸送される分子であることが示唆された。また、Rab10のエフェクター分子であるEHBP1およびその下流で機能するEHD1の局在を比較したところ、EHBP1はRab10と同様にカップ構造および管状構造の両方に局在した。一方、EHD1はカップには局在せず、チューブ構造のみに局在した。さらにEHD1は管状構造の伸長初期には局在せず、管状構造の消失時直前に強く局在した。このことは、Rab10-EHBP1複合体は、カップ形成の時期から形成されるが、Rab10-EHBP1-EHD1の３者複合体はチューブ消失直前に形成されることを示している。
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