2019 Fiscal Year Research-status Report
TGFbによるSirt1の制御と炎症性腸疾患の抑制機構の解明
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19K07377
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| Research Institution | Kindai University |
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Principal Investigator |
天野 恭志 近畿大学, 医学部, 助教 (20549331)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岡田 斉 近畿大学, 医学部, 教授 (20280620)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 炎症性腸疾患 / 線維化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
潰瘍性大腸炎やクローン病といった炎症性腸疾患では、免疫反応の機能障害によって、TGFbを含む炎症性サイトカインによる持続的な線維芽細胞の活性化により“線維化”が誘導されるが、線維芽細胞において、Sirtuin遺伝子群の1つ、Sirt1が抑制されることが1つの要因として考えられる。
本研究では、炎症性腸疾患における“線維化”形成に着目し、線維化を促進する主要因子TGFbによってSirt1がどのように抑制されるのかについて解明する。そして、Sirt1-NAD+経路を活性化するニコチンアミドモノヌクレオチドによって、線維化を抑制する遺伝子群の探索を行う。さらに、炎症性腸疾患マウスモデルにおいて、Sirt1-NAD+経路の活性化による線維化を抑制する機構について解明する。本成果は、近年、生活習慣の変化により患者数が増加している炎症性腸疾患に対する治療標的や予防医学の発展に寄与し得ると考える。
平成31年度は、マウス胎仔線維芽細胞 (MEF)と炎症性腸疾患マウスモデルにおいて、ニコチンアミドモノヌクレオチドによる線維化形成の抑制機構について解析を行った。
まず、ニコチンアミドモノヌクレオチドによる線維芽細胞の活性化を抑制する機構を明らかにするために、マウス胎仔線維芽細胞 (MEF)におけるRNAシーケンス による遺伝子発現解析を行った。TGFbで刺激したMEFに対して、ニコチンアミドモノヌクレオチドを同時に投与すると、線維化形成や慢性炎症に関与する、複数の分子経路が抑制された。
そして、デキストラン硫酸ナトリウム(DSS)による炎症性腸疾患マウスモデルにおいて、ニコチンアミドモノヌクレオチドによる線維化の抑制について解析を行った。野生型マウスに対してDSSとニコチンアミドモノヌクレオチドを同時に投与すると、大腸における線維化形成が抑制されることを定量性PCRによる遺伝子発現解析や組織学的解析によって明らかにした。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
RNAシーケンスの結果についてパスウェイ解析を行い、ニコチンアミドモノヌクレオチドによって変動する複数の分子経路を同定することができた。
また、DSSによる炎症性腸疾患マウスモデルにおいて、ニコチンアミドモノヌクレオチドの投与により、大腸の線維化形成が抑制されることを遺伝子発現解析や組織解析により確認できており、本研究は概ね順調に進展していると言える。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は、炎症性腸疾患モデルマウスにおいて、RNAシーケンス による遺伝子発現解析を行う予定にしている。また、遺伝子改変マウスにおいて炎症性腸疾患を誘導し、遺伝子発現解析や組織学的な解析を行い、線維化形成を抑制する分子機構についての解析を進める。
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| Causes of Carryover |
必要な消耗品について複数業者から相見積もりを取ったところ、予定していた金額より低い価格で購入することができた。そのため、マウスモデル実験で使用するNMNの購入費用に追加する予定である。
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