• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to project page

2019 Fiscal Year Research-status Report

細胞診による中皮腫診断に関する研究:遺伝子変異の病理診断システムへの応用

Research Project

Project/Area Number 19K07451
Research InstitutionFukuoka University

Principal Investigator

鍋島 一樹  福岡大学, 医学部, 教授 (40189189)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 濱崎 慎  福岡大学, 医学部, 准教授 (90412600)
Project Period (FY) 2019-04-01 – 2022-03-31
Keywordsmesothelioma / FISH / NF2 / CDKN2A/p16 / BAP1 / cytology
Outline of Annual Research Achievements

本年度はfluorescence in situ hybridization (FISH)施行可能な施設における診断感度向上を目指して、胸膜中皮腫(MPM)と反応性中皮過形成(RMH)の鑑別において、特異度は100%に保ちながら診断感度を上げる目的で、NF2 FISHの応用に取り組んだ。
細胞診への応用を最終目標としながら、まずは組織標本においてNF2 FISH法の応用が有用かを検討した。MPM 47例、RMH 27例を用いて、NF2 FISH単独あるいは既に有用な診断アッセイとして確立された9p21 FISH、MTAP 免疫染色(IHC)、BAP1 IHCとの併用が有用であるかを検討した。中皮腫においてはNF2のホモ欠失は1例も見られず、ヘミ欠失が特徴的で25/47例(感度53.2%)に認められ、RMH症例では全く認められなかった(特異度100%)。MPM群では9p21ホモ欠失は37/47例(78.7%)に、BAP1欠失は27/47例(57.4%)に、MTAP欠失は33/47(70.2%)に認められ、RMH群では何れも認められなかった(特異度100%)。MPM vs RMHの鑑別における診断感度は、9p21 FISHとBAP1 IHCの併用で93.6%であったが、9p21 FISH、BAP1 IHCにNF2 FISHを組み合わせることによってこの47例のコホートにおいては感度100%に達した。
上記のごとく、MPM vs RMHの鑑別において、NF2 FISHの応用は、特にこれまでの9p21 FISH, BAP1 IHCとの併用によって、今後症例数が増えたとしても、診断感度を100%近くにまで上げることができると考えられた。尚、NF2ヘミ欠失と生存期間との関連は認められなかった。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

NF2 FISHの組織標本でのMPM vs RMH鑑別における有用性は確認されたので、現在、細胞診への応用に取り組んでいる。細胞診では、スメア標本およびセルブロックのいずれにおいても技術的に応用可能であることは確認済みであるが、既に多くの施設で、免疫組織化学(IHC)の応用のために(中皮細胞起源の確認のためにIHCは必須である)セルブロック作製がルーチン化して行われているので、セルブロックを対象として検討を進めており、現時点では組織標本とほぼ同様のよい結果が得られている。
NF2免疫染色に関してはすでに市販の抗体3種類を用いて検討し、最も染色結果の良い1つを選定した。現在、中皮腫および反応性中皮過形成症例の組織切片での染色を施行中である。

Strategy for Future Research Activity

上記の細胞診症例(セルブロック)について、少なくともMPM 50症例以上、RMCも20症例まで増やして、NF2 FISHの有用性について、9p21 FISH, BAP1 IHC, MTAP IHCとの併用を含めて検討する予定である。
FISHの施行不能な施設を対象としたMPM vs RMH/RMC鑑別感度向上のために、NF2 IHCが応用可能かを検討する。
IHCはいずれの施設でも施行可能な手技ではあるが、その評価においてはpitfallも多く存在する。実際にBAP1 IHC, MTAP IHCの評価においてどのような問題がどのくらいの頻度で生じるか、またその場合の評価はどうすべきか、ということに関して検討し、明らかにすることによって、諸施設での日常診療に貢献したい。

Causes of Carryover

FISHにおいて最も高価なのはハイブリダイゼーションのためのプローブである。プロトコールの改良に取り組んだ結果、市販企業推奨の標本1枚当たりのプローブ量を減らすことが可能となった。その為に、プローブの想定使用量を下回り、若干の余裕が生じた。今年度(2020年度)はさらに多くの細胞診症例にてFISHを施行する予定であるが、当初予算額は初年度に比べて半減するので、その補充にあてる予定である。

  • Research Products

    (15 results)

All 2020 2019

All Journal Article (5 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 4 results) Presentation (10 results) (of which Int'l Joint Research: 3 results,  Invited: 3 results)

  • [Journal Article] Hemizygous loss of NF2 detected by fluorescence in situ hybridization is useful for the diagnosis of malignant pleural mesothelioma.2020

    • Author(s)
      Kinoshita Y, Hamasaki M, Yoshimura M, Matsumoto S, Iwasaki A, Nabeshima K
    • Journal Title

      Mod Pathol

      Volume: 33 Pages: 235-244

    • DOI

      10.1038/s41379-019-0309-6.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] MTAP immunohistochemistry is an accurate and reproducible surrogate for CDKN2A fluorescence in situ hybridization in diagnosis of malignant pleural mesothelioma.2020

    • Author(s)
      Chapel DB, Schulte JJ, Berg K, Churg A, Dacic S, Fitzpatrick C, Galateau-Salle F, Hiroshima K, Krausz T, Le Stang N, McGregor S, Nabeshima K, Husain AN.
    • Journal Title

      Mod Pathol

      Volume: 33 Pages: 245-254

    • DOI

      10.1038/s41379-019-0310-0.

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] 免疫組織化学-実践的な診断・治療のために-11.中皮腫.2020

    • Author(s)
      鍋島一樹、濵﨑慎、木下義晃、吉村雅代、松本慎二.
    • Journal Title

      病理と臨床

      Volume: 38 Pages: 142-148

    • DOI

      -

  • [Journal Article] Cytoplasmic MTAP expression loss detected by immunohistochemistry correlates with 9p21 homozygous deletion detected by FISH in pleural effusion cytology of mesothelioma.2019

    • Author(s)
      Hamasaki M, Kinoshita Y, Yoshimura M, Matsumoto S, Kamei T, Hiroshima K, Sato A, Tsujimura T, Kawahara K, Nabeshima K.
    • Journal Title

      Histopathology

      Volume: 75 Pages: 153-155

    • DOI

      10.1111/his.13872.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Morphological difference between pleural mesothelioma cells in effusion smears with either BAP1 loss or 9p21 homozygous deletion and reactive mesothelial cells without the gene alterations.2019

    • Author(s)
      Matsumoto S, Hamasaki M, Kinoshita Y, Kamei T, Kawahara K, Nabeshima K.
    • Journal Title

      Pathol Int

      Volume: 69 Pages: 637-645

    • DOI

      10.1111/pin.12862.

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] The Usefulness of NF2 Fluorescence In Situ Hybridization in the Diagnosis of Mesothelioma in Tissue and Cytological Specimens.2020

    • Author(s)
      Kinoshita Y, Hamasaki M, Matsumoto S, Yoshimura M, Sato A, Tsujimura T, Iwasaki A, Nabeshima K.
    • Organizer
      109th Annual Meeting of United States & Canadian Academy of Pathology
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 中皮腫診断の基礎と免疫染色・FISH.2019

    • Author(s)
      鍋島一樹
    • Organizer
      第8回神戸免疫組織診断セミナー(第8回いむーのセミナー)
    • Invited
  • [Presentation] Cytologic diagnosis of mesothelioma. Update with use of ancillary assays based on genetical changes in mesothelioma.2019

    • Author(s)
      Nabeshima K, Hamasaki M, Kinoshita Y, Matsumoto S, Sato A, Tsujimura T, Kawahara K, Hiroshima K, Kamei T.
    • Organizer
      The 42nd European Congress of Cytology
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 生検および細胞診におけるNF2 FISH:悪性胸膜中皮腫と良性中皮過形成の鑑別における有用性.2019

    • Author(s)
      木下義晃, 濱崎慎, 吉村雅代, 松本慎二, 岩崎昭憲, 鍋島一樹.
    • Organizer
      第1回日本石綿・中皮腫学会学術集会
  • [Presentation] 胸水細胞診を用いた悪性胸膜中皮腫診断プロセスと問題点. ワークショップ6. 体腔液の細胞診の進化.2019

    • Author(s)
      濵﨑 慎, 松本 慎二, 木下義晃, 亀井敏昭, 鍋島一樹.
    • Organizer
      第60回日本臨床細胞学会春期大会
  • [Presentation] Sarcomatoid mesotheliomaのアップデート. ワークショップ14. 胸部腫瘍性疾患のアップデート.2019

    • Author(s)
      鍋島一樹、濵﨑慎、木下義晃、吉村雅代、松本慎二、佐藤鮎子、辻村亨、亀井敏昭、岩崎昭憲.
    • Organizer
      第108回日本病理学会総会
  • [Presentation] 生検と細胞診による中皮腫診断:我々の戦略と現状.2019

    • Author(s)
      鍋島一樹
    • Organizer
      第52回日本胸部外科学会 九州地方会総会
    • Invited
  • [Presentation] 中皮腫診断 update:細胞診でどこまでせまれるか?!2019

    • Author(s)
      鍋島一樹.
    • Organizer
      第35回日本臨床細胞学会九州連合会学会
  • [Presentation] Malignant pleural mesothelioma: histologic and cytologic diagnosis based on genetic alterations.2019

    • Author(s)
      Nabeshima K.
    • Organizer
      Symposium: Translational Research on Metabolic and Inflammatory Diseases and Cancer.
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] 中皮腫の細胞診診断 update-中皮腫の遺伝子変異に基づく補助診断法.2019

    • Author(s)
      濵崎慎,木下義晃,松本慎二,佐藤鮎子,辻村 亨,河原邦光,廣島健三, 亀井敏昭,鍋島一樹.
    • Organizer
      第58回日本臨床細胞学会秋期大会

URL: 

Published: 2021-01-27  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi