Clinicopathological and molecular analyses of precursor lesions of urothelial carcinoma

2019 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K07466
• Research Institution: Wakayama Medical University
• Principal Investigator: 村田 晋一 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (20229991)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 松崎 生笛 和歌山県立医科大学, 医学部, 助教 (60647428)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 尿路上皮癌 / 尿路上皮異形成 / 核極性 / 異型尿路上皮 / MTOC / 前駆病変

Outline of Annual Research Achievements

１）尿路上皮癌の前駆病変として意義不明の異型尿路上皮および尿上皮異形成の症例、コントロールとして反応性異型、上皮内癌および浸潤癌の症例の収集を行った。現在、合計、300以上の症例の臨床病理学的特徴を解析中である。
２）従来の我々のMTOCの研究を進め、γ-tubulinの数的および局在的異常が尿路上皮癌の高異型度化に関与していることを明らかにした（英文誌に投稿中）。
３）MTOC関連の蛋白として、MAP7に注目し、その発現について解析を行った。その結果、MAP7の発現減弱化や局在が癌浸潤と関連していることを示唆された（英文誌に投稿準備中）。
４）一部の症例について、早期の尿路上皮癌において検出されることが多い遺伝子群（TERT promoter、FGFR3遺伝子、p16INK4a遺伝子、p53等）の点変異や欠失等の遺伝子異常について、NGS (Next-Generation sequencing)の技術を使い網羅的に解析した。高異型度症例では複数の遺伝子異常が起こっていることが明らかになった。
５）新たなin situでの解析法としてMultiple immuno-ISH stain with WSIを開発中である。この腫瘍はアルカリフォスファターゼの発色剤を使うことにより、染色・WSI・脱色・染色という過程を繰り返すことによって、複数の抗体による多重免疫染色に加えて、in situ hibridizationも行う手法であり、加えて、各染色像を疑似カラー化し、重ね合わせることによって、１つの腫瘍細胞から複数の蛋白発現や遺伝子異常を検出することを可能にする。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

ほど当初の研究計画通りの進捗である。
点突然変異をin situで視覚化する手法の開発については、良好な結果が得られていない。

Strategy for Future Research Activity

１）MTOC関連の蛋白であるMAP7の発現解析を終了し、英文誌に投稿する予定である。
２）早期の尿路上皮癌において検出されることが多い遺伝子群（TERT promoter、FGFR3遺伝子、p16INK4a遺伝子、p53等）の点変異や欠失等の遺伝子異常について、NGS (Next-Generation sequencing)の技術を使った網羅的解析の症例数を増やす。
３）新たなin situでの解析法としてMultiple immuno-ISH stain with WSIを開発を完成させる。