自己反応性Th17ヘルパーＴ細胞の長期生存機構の解析

2019 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K07488
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 竹馬 俊介 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 講師 (50437208)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 自己免疫疾患 / ヘルパーT細胞 / 慢性炎症 / メモリーT細胞

Outline of Annual Research Achievements

乾癬、リウマチ性関節炎、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症といった自己免疫疾患は近年増加の一途をたどり、この病態解明は社会的に緊急かつ重要な課題である。自己免疫疾患の多くは、自己反応性のIL-17産生性ヘルパーT細胞（Th17）が関与するが、Th17が他のヘルパーT細胞に比べて、体内で長期生存するメカニズムは知られていない。本研究では、自己反応性Th17を試験管内で誘導し、これを移入したマウスを解析することを通じ、Th17の長期生存機構を明らかにしようと試みている。
本年度は自己反応性Th17を試験管内で誘導する方法について検討した。TCRトランスジェニックマウスよりナイーブT細胞を98％以上の純度で分離し、T細胞レセプター（TCR)刺激、および炎症性サイトカインの存在下で活性化させた。Th17を誘導するとされていた条件では、6日間の培養後したT細胞からIL-17の産生が認められたが、予想に反し、これをマウスに移入してもTh17の生存及び自己免疫疾患の発症が認められなかった。そこで、サイトカインの条件、およびTCR刺激後の培養条件を検討し、一定の条件で高度に病原性のあるTh17を作ることができた。この細胞はマウスに自己免疫疾患を誘導し、コントロールのTh1によっては発症しなかった。
以上のことから、マウス体内で長期間生存し、自己免疫疾患を起こす「病原性Th17」を作出することができたと考えている。
また、関連してがんメモリーT細胞の作出などに関し論文発表した。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

当初目的通り、生体内で長期生存し、自己免疫疾患を起こすメモリー様T細胞を培養によって作出することができたため、達成度（２）と自己評価した。

Strategy for Future Research Activity

今後も、当初研究計画に順じ、移入した細胞を体内で追跡するモデル、薬剤の投与などにより病原性Th17の生存、病原性をコントロールするような実験を行う。

Causes of Carryover

研究に用いる試薬が、購入元メーカーにて生産停止となり、12月より受託サービスを利用して新規調整したため、この支払いが遅れ助成金を持ち越した。新年度4月に抗体の納品があったため、旧年度の予算は予定通り執行した。

Research Products

• [Journal Article] The NOTCH-FOXM1 Axis Plays a Key Role in Mitochondrial Biogenesis in the Induction of Human Stem Cell Memory-like CAR-T Cells. (2020)
  • Author(s): Kondo T, Ando M, Nagai N, Tomisato W, Srirat T, Liu B, Mise-Omata S, Ikeda M, Chikuma S, Nishimasu H, Nureki O, Ohmura M, Hayakawa N, Hishiki T, Uchibori R, Ozawa K, Yoshimura A
  • Journal Title: Cancer Res Volume: 80 Pages: 471-483
  • DOI: : 10.1158/0008-5472.CAN-19-1196
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] In Vitro Conversion of Activated T Cells into Stem Cell Memory-Like T Cells. (2019)
  • Author(s): Kondo T, Imura Y, Ando M, Chikuma S, Yoshimura A
  • Journal Title: Methods Mol Biol Volume: 2048 Pages: 41-51
  • DOI: 10.1007/978-1-4939-9728-2_4
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Loss of TET proteins in regulatory T cells promotes abnormal proliferation, Foxp3 destabilization and IL-17 expression. (2019)
  • Author(s): Nakatsukasa H, Oda M, Yin J, Chikuma S, Ito M, Koga-Iizuka M, Someya K, Kitagawa Y, Ohkura N, Sakaguchi S, Koya I, Sanosaka T, Kohyama J, Tsukada YI, Yamanaka S, Takamura-Enya T, Lu Q, Yoshimura A
  • Journal Title: Int Immunol Volume: 31 Pages: 335-347
  • DOI: 10.1093/intimm/dxz008
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research