2019 Fiscal Year Research-status Report
マラリアにおける免疫記憶抑制 ーIL-27依存的細胞死のメカニズム解明ー
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19K07528
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| Research Institution | Kobe Women's University |
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Principal Investigator |
木村 大輔 神戸女子大学, 健康福祉学部, 教授 (50423637)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
由井 克之 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 教授 (90274638)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | マラリア / 免疫記憶 / T細胞 / IL-27 / アポトーシス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究課題では、マラリア原虫Plasmodium berghei ANKA(PbA)感染中に誘導されるCD4+T細胞のアポトーシスにおいて、①IL-27の作用機序、②IL-27が関与する時期、および③IL-27産生細胞について明らかにすることを目的としている。
当該年度においては、目的①の作用機序を明らかにするために、以下の様な成果を得た。
IL-27が直接CD4+T細胞のアポトーシスを誘導するのかを明らかにするため、in vitroによる検討を行った。すなわち、C57BL/6あるいはIL-27受容体欠損マウスの非感染およびPbA感染後の脾臓中CD4+T細胞を精製した。各群の精製CD4+T細胞は、リコンビナントIL-27の存在および非存在下において、原虫粗抗原あるいは抗T細胞受容体抗体などで刺激培養を行った。リコンビナントIL-27の濃度、添加のタイミング、および培養時間等について検討した。しかしながら、どの条件下においてもリコンビナントIL-27の添加による有意なアポトーシス細胞の増加は認められず、in vivoで認められた現象を再現できなかった。この結果から、IL-27が直接CD4+T細胞のアポトーシスを誘導しているのではなく、間接的に誘導している可能性が考えられた。今後は脾細胞で同様の実験を行い、in vivoの現象を再現出来るのか検討する。
in vivoでマラリア原虫抗原特異的CD4+T細胞をモニターするために、マラリア抗原特異的CD4+T細胞受容体トランスジェニックマウスを導入した。さらにPbT-II細胞上のIL-27受容体の役割を見る目的で、IL-27受容体欠損マウス（WSX1-/-）バックグラウンドにかけ戻し、WSX1-/-PbT-IIマウスを作成した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
本研究は、長崎大学の動物実験施設で実施している。昨年度後半（2020年1月以降）に予定していたマウスへの感染実験が、新型コロナウイルスの影響により長崎への旅程を自粛し、計画を全てキャンセルしたため。
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| Strategy for Future Research Activity |
作成したWSX1-/-PbT-IIマウスとPbT-IIマウスより、それぞれCD4+T細胞を精製し、C57BL/6マウスへ共移入する。このマウスにPbAを感染させた後、移入した細胞をモニターする。これにより、マラリア感染後においてIL-27が、CD4+T細胞のアポトーシスを直接誘導しているのかについてin vivoで評価する。
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| Causes of Carryover |
当該年度後半に予定していた長崎大学での研究出張が、新型コロナウイルスで全てキャンセルとなったために、次年度持ち越し額が発生した。そのため、この計画を次年度に持ち越して行う。元々次年度に予定していた研究計画と並行して行うが、試薬、実験動物、および出張回数等について、無駄を省くことが出来るように計画を再設計する。
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