2020 Fiscal Year Research-status Report

Analysis of vertical transmission of herpes simplex virus.

Research Project

Project/Area Number	19K07597
Research Institution	Senri Kinran University
Principal Investigator	白木公康千里金蘭大学, 看護学部, 教授 (50135745)
Project Period (FY)	2019-04-01 – 2022-03-31
Keywords	母子感染 / 単純ヘルペスウイルス / 細胞トロピズム / 遺伝子変異 / 温度感受性
Outline of Annual Research Achievements	単純ヘルペスウイルスの母子感染した株の米国でクローニングした株はDNAをろ紙に吸着し持ち帰った。その試料から、HSVDNAを抽出して、UL13については、児から得られた株では、変異が多く存在した。それで、その株のクローン内のでほぼ同じ大きさで非必須遺伝子である UL21の遺伝子変異（variation）の有無の頻度の比較のため、UL21の塩基配列の決定を行った。そこでは、UL13のようにUL21にはVariationがなく、児の株ではUL13は変異を持つが、UL21では変異を持たないことが明らかになった。この同じHSV株内の遺伝子で、UL13とUL21は、両者とも増殖には非必須であることと遺伝子長が両者とも1.6kbと同程度であることから遺伝子変異の頻度の比較を行った。両遺伝子とも、欠損しても増殖は可能であるが、クローンによる欠損なので、遺伝子機能の欠損ではなく、一部分損なわれる程度であると思われる。この同じ新生児から分離した株内で、遺伝子変異の比較で、UL13では、UL21に比べ遺伝子変異が有意に高いことが明らかになった。現在、UL21遺伝子の解析結果を整理しているところである。これで、新生児からのウイルス分離、新生児と一般の分離されたウイルスの温度感受性と細胞トロピズムの特性と、代表として扱った新生児と母親の株での全遺伝子の変異が見つかったのはUL13のみであると、UL13とUL21の遺伝子変異の統計学的にUL13のみに遺伝子変異があることが確定された。これらをまとめて、HSV-2の母子感染においては、UL13の変異が細胞親和性に変異をもたらし、それによって母子感染が成立するという論文の投稿のを予定している。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 単純ヘルペスウイルスの母子感染した株の米国でクローニングした株はDNAをろ紙に吸着し持ち帰った。その試料から、HSVDNAを抽出して、UL13については、児から得られた株では、変異が多く存在した。それで、その株のクローン内のでほぼ同じ大きさで非必須遺伝子である UL21の遺伝子変異（variation）の有無の頻度の比較のため、UL21の塩基配列の決定を行った。そこでは、UL13のようにUL21にはVariationがなく、児の株ではUL13は変異を持つが、UL21では変異を持たないことが明らかになった。この同じHSV株内の遺伝子で、UL13とUL21は、両者とも増殖には非必須であることと遺伝子長が両者とも1.6kbと同程度であることから遺伝子変異の頻度の比較を行った。両遺伝子とも、欠損しても増殖は可能であるが、クローンによる欠損なので、遺伝子機能の欠損ではなく、一部分損なわれる程度であると思われる。この同じ新生児から分離した株内で、遺伝子変異の比較で、UL13では、UL21に比べ遺伝子変異が有意に高いことが明らかになった。現在、UL21遺伝子の解析結果を整理しているところである。これで、新生児からのウイルス分離、新生児と一般の分離されたウイルスの温度感受性と細胞トロピズムの特性と、代表として扱った新生児と母親の株での全遺伝子の変異が見つかったのはUL13のみであると、UL13とUL21の遺伝子変異の統計学的にUL13のみに遺伝子変異があることが確定された。これらをまとめて、HSV-2の母子感染においては、UL13の変異が細胞親和性に変異をもたらし、それによって母子感染が成立するという論文の投稿のを予定している。
Strategy for Future Research Activity	これまでの成果をまとめて論文とすることで、この研究の成果としたい
Causes of Carryover	新型コロナのため、細胞培養のプラスチック製品や試薬等の品切れにより、物品購入ができず、出張の中止等で残額が生じた。