血清オミックス解析を中心とした多発性骨髄腫の治療薬レナリドミドの感受性因子の探索

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K07756
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 李 政樹 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 講師 (00567539)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 前川 京子 同志社女子大学, 薬学部, 教授 (70270626)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 多発性骨髄腫 / レナリドミド / 感受性

Outline of Annual Research Achievements

本研究では、レナリドミド治療前に患者さんから採取した検体（骨髄液及び末梢血）から治療効果を予測しうるバイオマーカー候補を探索することを目的とする。骨髄液から骨髄腫細胞・ストローマ細胞の遺伝子変異・発現量解析、末梢血血清からはエキソソーム・遊離核酸のmiRNA発現量解析及び血清全体の脂質メタボローム解析を行い、治療効果に関わる遺伝子・代謝物を同定する。これまで、レナリドミド＋デキサメサゾン（Ld）療法を導入された再発難治性多発性骨髄腫患者83名の骨髄種細胞よりRNAを抽出し、レナリドミドの感受性に関わる可能性のある4つの遺伝子、CRBN、IKZF1、IKZF3、KPNA2のmRNA定量を行い、IKZF1 / CRBN比がLd療法における治療効果に関連したバイオマーカーとなりうる可能性を見出した。今年度は、再発難治性骨髄腫患者さんの初発時および難治状態（レナリドミド耐性）のぞれぞれの末梢血血漿からcfDNAを抽出し、骨髄腫の病態に関わる遺伝子群の変異解析を行い、レナリドミド耐性時には複数個の遺伝子変異が関与することを見出した。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

2020年度は、レナリドミド治療の感受性に関わる因子を患者さんの末梢血のcell free DNA解析を行なったが、メタボローム解析はまだ着手できていない。今年度は、レナリドミド治療前後の末梢血から、薬剤の感受性・耐性に係る脂質成分等を同定する予定である。その途上であるため、やや遅れていると判断した。

Strategy for Future Research Activity

これまでの研究成果を継続発展させ、引き続きレナリドミドの感受性に係る因子を患者さんの末梢血血清中の物質の網羅的な探索より同定することを目標とする。今後、末梢血の血漿の脂質メタボローム解析を多数検体で行い、また、初発から治療抵抗性に至るまでの経時的な解析で、治療の感受性や耐性との関連を解析していく予定である。また、血清中のマイクロRNAの解析においては、各マイクロRNAの発現量と、治療による効果（最良奏効効果や無増悪生存期間・生存期間など）を照らし合わせることで、バイオマーカーの候補となりうるものを同定する。

Causes of Carryover

(理由)研究を進めていく上で必要に応じて研究費を執行したため当初の見込み額と執行額は異なったが、研究計画に変更はなく、前年度の研究費も含め、当初予定通りの計画を進めていく。(使用計画)
次世代シークエンスに必要な試薬群（ライブラリー作成試薬、シークエンス試薬など）を購入する。さらには、抽出された核酸のなかでも、cell free DNAおよびマイクロRNAの解析として、必要な試薬群も購入予定である。また、メタボローム解析に必要な使用群も購入予定である。