Identification of novel cell surface antigens for cancer stem cells using single-cell technology

2022 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19K07776
• Research Institution: Kindai University
• Principal Investigator: 今野 大治郎 近畿大学, 理工学部, 准教授 (00362715)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 立花 太郎 大阪公立大学, 大学院工学研究科, 教授 (80311752)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: がん幹細胞 / モノクローナル抗体

Outline of Annual Research Achievements

生体がん組織におけるがん幹細胞の性状解析や細胞系譜、分化成熟過程を理解するうえで、細胞表面抗原を認識するモノクローナル抗体を用いた細胞識別法は、現代の医学研究に欠かすことの出来ない基盤技術である。本研究ではマウス人工グリオーマ幹細胞（Glioma-Initiating Cell: GIC)を抗原とし、ラット腸骨リンパ節法による高効率なハイブリドーマ産生法を用いることで、新規グリオーマ幹細胞（Glioma Stem Cell: GSC）表面抗原認識モノクローナル抗体の樹立を目指した。その結果、マウスGICに高選択的に反応し、non-GICへは全く反応性を示さない新たなクローン5E4の樹立に成功した。これら5E4抗体はヒトグリオーマ由来幹細胞においても腫瘍形成能を有すクローンに顕著な反応性を示す一方、腫瘍形成能を示さないクローンへの反応性は認められなかった。これらの結果は、5E4抗体がグリオーマ幹細胞をターゲットとした抗体医薬品として利用できる可能性を示していた。そこで最終年度では、抗体のADCC活性を利用した悪性グリオーマ幹細胞の選択的殺傷の可能性をin vitro実験系において検証した。その結果、死細胞から放出されるLDHの活性を指標としたADCCアッセイでは、抗体の添加による顕著な効果は認められなかった。しかしながら、CD16aを発現させたNK92細胞をエフェクター細胞として添加した場合において、抗体添加によるADCC活性が認められた。これらの結果から、新規に樹立に成功した5E4抗体の抗体医薬品としてポテンシャルが示された。