The role of microglia in the propagation of tau aggregates

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K07825
• Research Institution: Kagoshima University
• Principal Investigator: 松本 信英 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 助教 (40432950)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 神経変性疾患 / ミクログリア / タウ / TREM2

Outline of Annual Research Achievements

<ニューロン・ミクログリア系細胞株の共培養伝播モデルを用いた検討>
EGFP-タウ発現SH-SY5Y細胞に不溶性タウを導入し不溶性EGFP-タウ凝集体を形成させ、mCherry-タウ発現するSH-SY5Y細胞と共培養すると不溶性mCherry-タウが蓄積した。この結果から、EGFP-タウ発現SH-SY5Y細胞からseedとなるEGFP-タウがmCherry-タウ発現細胞に伝播し、さらにmCherry-タウの凝集を誘導することがわかった。さらにこの伝播モデルにミクログリア系細胞株BV-2あるいは初代培養ミクログリアを加え共培養すると不溶性mCherry-タウ蓄積が減少する傾向が見られたことから、ミクログリアは不溶性タウの細胞間伝播を何らかの方法で抑制していることが示唆された。今後、ミクログリアにおけるTREM2のノックダウン等を行い、TREM2の有無が不溶性タウの細胞間伝播に与える影響を検討する予定である。
<TREM2欠損マウスを用いたin vivo伝播モデルの検討>
TREM2欠損タウオパチーモデルマウスTg601、PS19の脳内に不溶性タウを投与することによりタウ伝播モデルを作製し、行動試験およびタウ病理伝播においてTREM2欠損が与える影響の検討を行っている。 また、短期間でタウ病理の伝播を観察できるタウオパチーモデルマウスとして利用することを目的として、Tau-CTF過剰発現マウスの作出を試みた。CRISPR/Cas9システムによるゲノム編集を行い、Tg601マウス が持つ野生型のヒト全長タウのトランスジーンをTau-CTFに改変した。1系統において目的の改変を確認し、ウエスタンブロッティングによる確認の結果脳において不溶性のタウが増加していることがわかった。今後このTau-CTF Tgマウスを用いたタウ伝播モデルの確立を進める予定である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

タウのin vivo伝播モデルについて、当初の予定よりも作製に時間を要したため。

Strategy for Future Research Activity

in vitroモデルについては、脂質刺激により生存性を増強したBMDMを利用することで長期観察が可能な系の構築を試みる。また、in vivoモデルについては新たなタウオパチーモデルマウスとして作出したTau-CTFトランスジェニックマウスの解析を進めている。