2021 Fiscal Year Annual Research Report
Establishment of detection systems for minimum residual diseases of mature lymphoid malignancies using flow cytometry
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19K07903
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| Research Institution | National Cancer Center Japan |
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Principal Investigator |
松下 弘道 国立研究開発法人国立がん研究センター, 中央病院, 科長 (50286481)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | フローサイトメトリー / 微小残存病変 / 慢性リンパ性白血病 / 悪性リンパ腫 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
造血幹細胞移植の普及や分子標的療法の開発により良好な治療反応性が得られる成熟リンパ系腫瘍症例が増加しており、微小残存病変（MRD）陰性を確認することが治療終了・中止の判断の根拠として期待されている。本研究では、マルチカラーフローサイトメトリーを用いて細胞表面マーカーを利用した容易でかつ有用な日常臨床用のMRD評価方法を構築することを目的としている。
今年度も、一昨年度、昨年度に引き続き慢性リンパ性白血病（CLL）のMRD検出系の確立に着目をして研究を進めてきた。12種類の細胞表面マーカーを利用したCLL-MRD解析パネルは７～８種類の細胞表面マーカーを利用した場合に比べ腫瘍細胞集団の検出は容易になったものの、検出感度の改善は得られなかった。そこで解析前の検体処理について検証を行った。溶血操作を抗体反応前後で行い比較したところ、後で溶血操作を行った方がFSC/SSCプロット上での細胞集団が明瞭であった。またフローサイトメトリーのマルチカラー化に伴って使用される高輝度色素（Brilliant dye）の最適化のために使用されるBrilliant Stain Bufferの効果について検討したが、その有無により本パネルを用いた解析の結果に変化はなくそのメリットは認められなかった。
実用的なCLL-MRD検出システム確立のために必要な取り込み細胞数は50万個であり、10^4レベルの検出感度を確実にするためには、どのような検体においても少なくとも10～20個の腫瘍細胞を確実に検出する必要がある。今後、European Research Initiative on CLL (ERIC)の解析アルゴリズムを参考にgating strategyの再検証を行い、検出感度の確保に努めたい。
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[Journal Article] Convenience of Hgb-O detected by optical method in XN-series hematology analyzers in evaluating hemoglobin concentration in samples with chylous turbidity.2021
Author(s)
3.Aruga Y, Ikeda C, Hanai A, Yoshimura S, Kito M, Miyaki S, Tsubokura M, Yasuno Y, Hayashi C, Miyakoshi M, Nishino T, Kawamura K, Matsushita H.
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Journal Title
Sci Rep
Volume: 11
Pages: 14978
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Association between measurable residual disease kinetics and outcomes of Philadelphia chromosome-positive acute lymphoblastic leukemia.2021
Author(s)
4.Hara R, Onizuka M, Kikkawa E, Shiraiwa S, Harada K, Aoyama Y, Ogiya D, Toyosaki M, Suzuki R, Machida S, Ohmachi K, Ogawa Y, Kawada H, Matsushita H, Ando K.
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Journal Title
Ann Hematol
Volume: 100
Pages: 2479-86
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Usefulness of hematopoietic progenitor cell monitoring to predict autologous peripheral blood stem cell harvest timing: A single-center retrospective study.2021
Author(s)
5.Kasane M, Kurosawa S, Kojima M, Iwashita N, Kase Y, Tsubokura M, Nakabayashi S, Ikeda C, Kawamura K, Matsushita H, Narita R, Fukumoto H, Fujino T, Makita S, Fukuhara S, Munakata W, Suzuki T, Maruyama D, Ito A, Tanaka T, Inamoto Y, Kim SW, Tajima K, Tanosaki R, Izutsu K, Fukuda T.
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Journal Title
Transfus Apher Sci
Volume: 60
Pages: 103150
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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